mir-192通过靶向ercc3和ercc4蛋白表达逆转胃癌细胞顺铂耐药性的研究

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1、分类号：______密级:UDC：编号，学位论文M1R-192通过靶向ERCC3和ERCC4蛋白表达逆转胃癌细胞顺铂耐药性的研究MtR-192reversescisplatinresiscawceufiiumangaslnccancercdllinesbytargetingERCC3andERCC^!黄娜娜指导教砰#名顾康生教授安徽医枓大学第一玢属医院申请学位经別项士专並名称肿瘤学提交论文匕期2015^53论文答辩日期2015-GS学位泠予串位和曰期安徐医科:K学2015-06答辩委M会主席jIM4评阅人2015年5月安徽医科大学ANHUIMEDICA

2、lLUNIVERSITY硕士学位论文论文题目MiR-192通过靶向ERCC3和ERCC4蛋白表达逆转胃癌细胞顺铂耐药性的研究MIR-192reversescisplatinresistanceofhumangastriccancercelllinesbytargetingERCC3andERCC4作者姓名黄娜娜指导教师顾康生教授学科专业肿瘤学研究方向肿瘤治疗论文工作时间2013年9月至2014年12月安徽医科大学硕士学位论文目录一、缩略词表………………………………………………1二、中文摘要………………………………………………3三、英文摘要…………………

3、……………………………5四、正文……………………………………………………71.引言……………………………………………………72.材料和方法……………………………………………93.结果……………………………………………………244.讨论……………………………………………………325.结论……………………………………………………346.参考文献………………………………………………35五、附录………………………………………………39六、致谢……………………………………………………40七、综述……………………………………………………41安徽医科大学硕士学位论文

4、中英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称miRNAmicroRNA微小RNADEPCDiethylpyrocarbonate二乙基焦碳酸盐FCMFlowcytometry流式细胞术EDTAEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸改良型RPMI-1640RPMI-1640RPMImedium1640培养液PMSFPhenylmethylsulfonylfluoride苯甲基磺酰氟化物PIPropidiumIodide碘化丙啶磷酸盐缓冲液PBSPhosphatebufferedsalineKDaKilodalton千道尔顿FB

5、SFetalbovineserum胎牛血清DMSODimethylsulfoxide二甲亚砜APAmmoniumpersulphate过硫酸胺DDPcisplatin顺铂半数抑制浓度IC50the50%inhibitionconcentrationMDRmultidrugresistance多药耐药mRNAmessengerRNA信使RNARNARibonucleicacid核糖核酸核酸剪切修复NERNucleotideexcisionrepair十二烷基磺酸钠SDSSodiundodecylsulfateTBSTTrisBufferedSalinTw

6、een-20Tris缓冲盐水+吐温1安徽医科大学硕士学位论文TEMEDN,N,N',N'-tetraxnethylenedia-四甲基乙二胺mineHRPHorseradishperoxidase辣根过氧化酶2安徽医科大学硕士学位论文MiR-192通过靶向ERCC3和ERCC4蛋白表达逆转胃癌细胞顺铂耐药性的研究中文摘要研究目的胃的恶性肿瘤是临床诊断中一种常见的疾病，胃癌早期无明显症状，发现时往往为中晚期，而化疗是中晚期患者必不可少的。在胃癌化疗药物中，铂类是基础且重要的一种；然而，铂类原发或继发耐药是导致胃癌治疗失败的重要原因，探讨耐药机制、逆转铂类

7、耐药是目前研究热点。研究表明：核苷酸切除修复（NER）是顺铂获得性耐药性的重要原因之一；而miRNA的表达异常（微RNA）可以通过多种细胞信号传导途径调节胃癌细胞的顺铂耐药性。近期有研究显示miR-192在HepG2.2.15细胞中可以通过靶向抑制核苷酸切除修复途径中的ERCC3、ERCC4的表达增强对顺铂的敏感性。提示miRNA-192也许可以作为肝癌的治疗靶标；而miRNA-192在胃癌细胞中是否可以通过核苷酸切除修复途径调控顺铂耐药性还不清楚，值得探讨。方法采用彗星实验的方法检测人胃癌细胞SGC-7901与人胃癌细胞顺铂耐药细胞株SGC-7901

8、/DDP的DNA损伤修复的能力，观察SCGE检测图像的尾长以评定DNA的修复能力。采用real