mir-423、mir-18b、mir-129在老龄小鼠心衰过程中的表达

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1、学校代码10459学号或申请号201212443239密级公开硕士学位论文miR-423、miR-18b、miR-129在老龄小鼠心衰过程中的表达作者姓名：何芳导师姓名：杨国杰教授学科门类：医学专业名称：老年医学培养院系：郑州大学第一附属医院完成时间：2015年5月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterExpressionofMiR-423,MiR-18bandMiR-129inAgedMicewithHeartFailureFangHeSupervisor:Prof.GuojieYangDepartm

2、entofGeriatricsFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay2015原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研宄所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研宄作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者石笔曰期：如《年文月乂曰学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家

3、有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：巧5$曰期：年t月认曰摘要miR-423、miR-18b、miR-129在老龄小鼠心衰过程中的表达硕士研究生：何芳导师：杨国杰专业：老年医学郑州大学第一附属医院老年心血管科河南郑州450052摘要背景及目的随着人口老龄化，心力衰竭（简称心衰）基础疾病（

4、冠心病、高血压病、心肌梗死等）的发病率逐年升高，心衰的发病率及死亡率也随之不断提高。寻找一种既能诊断心衰又能较好反映其严重程度的检测指标有着重要的临床意义。心衰发展过程中伴随着多种结构的改变，如心肌细胞肥大、凋亡、间质纤维化、毛细血管数量减少及免疫系统的激活等，结构的改变引起心脏功能的变化（如射血量降低、充盈压增高等），但是潜在的分子机制尚未阐明。微小RNA（miRNAs）是具有21-25个核苷酸的内源性小分子RNA。近年来，大量研究表明血清中的miRNAs已作为多种组织损伤及病理过程的敏感和特异的生物标志物。miRNAs通过多种心脏病理改变引起心肌重构、心功能降低，最终导致心

5、力衰竭。因此，我们可以通过一些特定的miRNAs水平来诊断心力衰竭。本研究包括：1）建立老龄小鼠心衰模型，观察老龄小鼠心衰过程中miR-423、miR-18b、miR-129的表达差异。2）研究老龄小鼠在心衰发生发展过程中，miR-423的表达趋势，探讨其与心衰的关系，为心衰的诊断或预后提供价值。方法1.18月龄雄性健康小鼠共54只，按照投硬币方法随机分成2组。心衰组I摘要（n=38）：常规饲养，于腹部皮下注射异丙肾上腺素（ISO）持续14天，构造老龄小鼠心力衰竭模型；对照组（n=16）：常规饲养，相同方法注射等量生理盐水14天。注射后继续常规饲养4周。2.4周之后行超声心动图

6、和心电图，比较两组心脏结构、功能和心率。然后处死小鼠10只（心衰4w组），取心脏标本，分别给予全心及左室称重，计算出左室质量指数（LVMI）。心肌标本经固定、脱水、包埋后，切得组织切片，分别给予常规HE染色。3.继续饲养2周后处死小鼠10只（心衰6w组），剩余小鼠继续饲养2周后处死（心衰8w组）。处死后按压小鼠的眼球取血4ml，离心后收集上清液。4.从血浆中提取总RNA并进行逆转录反应，获得相应miRNA的cDNA，以β-actin为内参进行标定，采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测miR-423、miR-18b、miR-129在心衰小鼠及正常小鼠血清中的表达。5.用

7、PCR检测miR-423在各组血清中表达量，并进行对比。6.应用SPSS16.0软件包进行数据处理，计数资料用均数±标准差（x±s）表示，计量资料若满足正态性，采用t检验，若不满足正态性，采用秩和检验；多组比较用Kruskal-WallisH检验，P<0.05为差异有统计学意义。结果1.左室质量指数(LVMI，mg/g)比较：对照组为2.68±0.32，心衰组为5.70±0.54。与对照组比较，心衰组左室质量指数明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）。2.HE染色：正常对照组小鼠的心肌细