a群脑膜炎多糖蛋白结合疫苗的化学修饰及修饰后免疫学性质研究

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3、：巧鸟３键；Ｖ山过５、全片；浩式品柏的A群脑膜炎多糖蛋白结合疫苗的化学修饰及修饰后免疫学性质研究摘要：脑膜炎奈瑟式球菌会引起严重的疾病比如脑膜炎，作为一种关键的致病因素，脑膜炎荚膜多糖曾作为疫苗用于预防脑膜炎，但免疫效果较差，不能引起免疫记忆。近年来，多糖结合疫苗的发展一定程度上解决了这个问题。相比传统多糖疫苗，多糖蛋白结合疫苗是T细胞依赖性抗原，对两岁以下婴幼儿的保护效果有较大幅度提升并有免疫记忆。但已有研究发现当载体预免疫结合疫苗的蛋白时,C群脑膜炎荚膜多糖与破伤风类毒素的结合物在0.025-0.25μg剂量下，多糖的免疫原性提高，在25μg以上时，多糖的免疫原性却降低。即在预免疫载体

4、蛋白过载时,会导致多糖免疫原性抑制（CIES现象）。同时,在多价结合疫苗中应用相同载体蛋白时，会使其中一种或多种成分不能充分发挥免疫反应。但还不清楚抑制还是提高蛋白特异性免疫原性可以提高结合疫苗的多糖特异性免疫原性。另外载体蛋白有特异性，因此研究载体对多糖免疫原性的影响对结合疫苗的发展有重要作用。本实验使用FDA批准使用的线性PEG和载体破伤风类毒素（TT）本身做修饰剂，制备出三种A群脑膜炎结合疫苗。该方法由如下步骤组成：(1)用溴化氰活化脑膜炎球菌多糖，然后用异型双功能试剂N-2-胺乙基-马来酰亚胺衍化活化脑膜炎球菌多糖；(2)载体蛋白的巯基化；(3)衍化的脑膜炎球菌多糖与巯基化的载体蛋白

5、结合；(4)载体蛋白的PEG修饰；VI当PEG与PS的质量比为3：10，10：10及修饰剂TT与PS质量比1：1时，蛋白的IgG抗体滴度为修饰前的0.89倍，0.49倍，1.61倍。多糖的IgG抗体滴度分别是修饰前的2.6倍，0.63倍，0.56倍。我们假设PEG适当抑制蛋白的免疫原性，有利于多糖免疫原性的提高,PEG过度修饰，强烈抑制载体的免疫原性，因不能充分形成APC-MHCII-TCR，不能充分激活T辅助细胞，从而激活成熟B细胞，多糖免疫原性反而下降。TT修饰载体时，蛋白的抗原表位剧烈增多，与多糖半抗原竞争成熟B细胞从而产生很强的载体免疫原性并削弱多糖免疫原性。温和PEG化载体修饰的脑

6、膜炎多糖结合疫苗可开发为供人体免疫接种用的新型、高效多糖结合疫苗，用于预防流行性脑膜炎奈瑟氏球菌引起的感染，也可用于优化联合疫苗的免疫计划和设计理想载体蛋白。关键词：脑膜炎荚膜多糖；结合疫苗；聚乙二醇化；寡聚体化；多糖特异性免疫VIISTUDYONTHECHEMICALMODIFICATIONANDIMMUNOLOGICALPROPERTIESCHANGEOFMENINGOCOCCALGROUPAPOLYSACCHARIDECONJUGATEVACCINETingtingZhang(Chemistry)DirectedbyYanfeiWangAbstract：Neisseriameningi

7、tidiscancauseseverediseasessuchasmeningitisinchildren.Asakeyvirulencedeterminant,meningococcalcapsularpolysaccharide(PS)ispoorlyimmunogenicthatcannotinduceimmunologicalmemory.Inrecentyears,thedevelopmentofc