鸡伤寒沙门菌1009δspicδcrp减毒株的构建及其安全性和免疫效力研究

《鸡伤寒沙门菌1009δspicδcrp减毒株的构建及其安全性和免疫效力研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、－皂＾？辜＞．＾；雀可變跟焉等：．ｔ手＾货合立蠢心：＾碱—叫．义ｆ、ＹＡＮＧＺ匪ＵＮＩＶＨＲＳ肝＾‘ｂ１矣寒＾尤ｔ：孚？女—苗—二。－．．．，．；＇苗扛為＾若７＜今＾六二？＞／、硕去学备冷文戸私Ｔ．．ｙ；；八二＇？’（学术型）奇遠■＾＾（：户＼心巧細导‘＇＾．＾＾兵可给、口菌ｌＯＷ＾＾ｃ＇ｙ；减毒株的跨：Ｓ於巧鸡伤寒沙矜会作苗，；、安全性和免疫效，＾於擎私及其力研究ｋ這爹護＇—．．．．＇墓細瓷．梅細為二－／＊４＾江苏扬州，２２５００９Ｔ指导教师神名＞潘志明教授，

2、扬州大学，＾ｊ．、、－＇江苏扬州２２５００９大学，焦新安教授，扬州，？＾少－／一每．申请学位级别：硕壬学科专业名称：遗传学，‘乏、，论文提交日期：２０１５年５月论文答辩日期：謝５年５月方苗？２０１５三：、学位授予单位予日期：年６月：扬州大学学位授４亚＇＇．答辩委员会主席；戴片－与．‘，身Ｐ向；夸；衣．貧片據＂、，－作．、．Ｊ．實泛璋公＾：ｃ与凝命达：誤苗：—…‘＇礙為衣於巧令卢；許吟冷＇乃＞寺＇乃寇：荒兴槪遂之净義矜〇ｉ５，、芳：．－＾遣菩Ｔ違袭餐巧—＾－玄芝？乃＞；，产＾一产，冷

3、义、；＇＾＾激媒纔、蔡纖餐若《：Ａ’程墨鸡伤寒沙口菌减毒株１００９ｗｚＣＡｃｗ的构建及其安全性和免疫效力评价Ｉ’鸡伤寒沙口菌ｌ〇〇９ＡｗｚＣＺｋ７ｐ减毒株的构建及其安全性和免疫效力的评价研究生：程墨导：リ币潘志明教授焦新安教授中文摘要（化ｗｌｔｈｏｉｄ）是因感染鸡伤寒沙口菌（况如ｅ航！Ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ）而导致的急禽伤寒ｙｐ７０口，表现出腹泻，性或慢性败血性禽类传染病、厌食、精神不振等症状给养禽业造成巨大的经济损失，，，。该病可通过药物进行治疗虽然减少了死亡但长期用药会増加成本易一产生耐药性，且

4、愈后带菌，因此。，免疫接种仍是预防和控制该病的个理想选择最先被用于控制禽伤寒的减毒活疫苗９Ｒ，能有效的抵抗鸡伤寒沙口菌的感染，但其残留的毒一，种安全有效的鸡伤寒沙口菌减毒疫苗仍将十分必要力仍有致病性。因此研制。本研充利用自杀质粒介导的同源重组技术构建出鸡伤寒沙口菌１００９株的ｗＺＣ基因缺失一株１００９Ａｗ／Ｃ，在此基础上，运用Ｍ莖菌体同源重组系统进步敲除ＣＷ基因，构建出鸡伤寒沙口菌１００９ＡＷ忙Ａｃｗ双基因缺失株。ＰＣＲ和测序鉴定结果表明，成功获得鸡伤寒沙口■菌双基因缺失株１００９Ａ５ＣＡｃ，１知／ｔ？。生物学特性研究结果最

5、不００９株巧／Ｃ和基因的缺失能够得到稳定的遗传，，，缺失株部分生化特性发生了变化生长速度减慢与野生株相比其对维鸡的ＬＤｓｏ升高了１０７倍，表明双基因的缺失使鸡伤寒沙口菌１００９心扔ＣＡｃｗ的毒力减弱。’为评价１００９ＡｗｚＣＡｃｗ减毒株的安全性及保护效力，本实验采用肌肉注射的方式分别５６７ｘｘｘＷ１１〇ＣＦＵ、１１〇ＣＦＵ、ｌｌ〇ＣＦＵ的剂量对３日龄维鸡进行初次免疫并于１周后再次免疫，同时对照组用ＰＢＳＷ相同方式进行免疫。体重测定及临床观察结果显示其与对照组没有差别，，表明减毒株对维鸡的生长没有影响且不会出现副作用细菌

6、在肝脏和脾脏中短暂定殖后可被机体清除。血清ＩｇＧ抗体水平和淋己细胞增殖的检测结果表明，肌肉注射免疫后减毒株诱导维鸡产生了良好的细胞免疫和体液免疫应答。免疫后２１天，攻毒保护效力结果显示免疫组在攻毒后没有出现临床症状，免疫保护率为１００％。‘ｌＡ另外，本研究Ｗ００９ｓｐｚＣＡｃｒ／？减毒株口服免疫维鸡后，对减毒株的安全性和免疫效力进行了巧步研究。在对３日龄维鸡进行口服免疫并于１周后进行再次免疫后，免疫组维鸡体重增长与对照没有显著差异，并于初次免疫３周后达到；产生了较高的ＩｇＧ抗体水平－４－－最高且显著高于对照组；正、正６和

7、忙ｉｐ的表达水平也出现上调。在初次免疫后２１天用２扬州大学硕±毕业论文强度株ＳＧ９攻毒后免疫组的保护率为１００％，而对照组则为３０％。同时组织病理切片也显示，免疫组无病变而对照组脏器病变明显。结果表明，１００９ＡＳ扭ｃＡｃ巧具有良好的安全性并能诱导维鸡产生有效的免疫应答，是理想的防治鸡伤寒的疫苗候选株，为实现在实际生产中使用疫苗来预防并控制鸡伤寒奠定了基础。关键词：鸡伤寒沙口菌；减毒活疫苗；１００９Ａ５内ＣＡｃｗ；安全性；保护力ＡＹ程墨鸡伤寒沙口菌减毒株１００９ｗＫｋＴｐ的构建及其安全性和免疫效力评价３Ｔｈｅ

8、ＤｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｆＡｔｅｎｕａｔｅｄ減歸巧ｇ／／。Ｇａｌｌｉｎａｒｕｍｐ１００９Ａ５？／ＣＡｃｒａｓ