骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞自噬水平的研究

《骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞自噬水平的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R55学校代号：10062密级：学号：2012602666硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞自噬水平的研究TITLE:Autophagylevelofbonemarrowmononuclearcellswasabnormalinpatientswithmyelodysplasticsyndromes一级学科：临床医学二级学科：内科学血液病论文作者：郭利芳指导教师：王化泉主任医师天津医科大学研究生院二O一五年五月I分类号：R55学校代码：10062密级：学号：2012602666学位类别：科学学位□√专业学位

2、学科门类：医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞自噬水平的研究TITLE：Autophagylevelofbonemarrowmononuclearcellswasabnormalinpatientswithmyelodysplasticsyndromes一级学科：临床医学二级学科：内科学血液病论文作者：郭利芳指导教师：王化泉主任医师导师组成员：邵宗鸿教授刘春燕副主任医师江汇涓副主任医师天津医科大学研究生二O一五年五月II天津医科大学硕士学位论文学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行

3、研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□√。（请在相对应的方框内打“√”）学位论

4、文作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日III天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓单个核细胞Beclin1、哺乳动物雷帕霉素靶点（mTOR）、微管相关蛋白轻链3（LC3）水平，初步探讨MDS患者骨髓原代细胞自噬水平的改变。材料与方法38例MDS患者为实验组（MDS组），26例非恶性贫血患者为对照组。骨髓细胞铁染色检测骨髓细胞内、外铁含量和环形铁粒幼细胞；流式细胞仪检测骨髓单个核细胞活性氧（ROS）水平；透射电镜观察骨髓单个核细胞内自噬泡数量；丹（磺）酰戊二胺（MDC）法检测骨髓单个核细胞自噬泡水平；免疫荧光法观察观察骨髓单个核细胞中微

5、管相关蛋白轻链3（LC3）蛋白表达，qPCR法检测自噬相关基因Beclin1、LC3、mTORmRNA表达，Westernblottiing检测Beclin1、LC3蛋白的表达。结果(1)骨髓细胞铁染色发现MDS患者细胞外铁、细胞内铁和环形铁粒幼细胞数量均较对照组增加。（2）流式细胞术检测到MDS组（n=7）患者骨髓单个核细胞ROS水平（1352.41±667.51）高于对照组ROS水平（n=5，596.46±233.99，P＜0.05）。（3）透射电镜观察到MDS患者骨髓细胞内存在双层膜结构自噬泡，内含溶酶体。（4）MDC染色发现MDS组（n=4）染色阳性（自噬泡）细胞数目比例

6、（9.75%±2.63%）显著高于对照组（n=5，2.90%±0.89%，P＜0.05）。（5）免疫荧光法观察到MDS组（n=4）LC3阳性细胞数目比例（6.13%±1.03%）显著高于对照组（n=4，1.5%±0.58%，P＜0.05）。（6）qPCR法检测到低危/中危-1MDS组（n=14）骨髓单个核细胞Beclin1mRNA表达水平（3.61±3.02）显著高于对照组（n=11，1.55±1.03，P＜0.05）；中危-2/高危MDS组（n=8）Beclin1mRNA表达水平为2.63±2.79，高于对照组，但没有统计学差异，P＞0.05；低危/中危-1MDS组（n=10）

7、骨髓单个核细胞LC3AmRNA水平(6.56±3.97)显著高于对照组（n=7，1.21±0.95，P＜0.05）；低危/IV天津医科大学硕士学位论文中危-1MDS组（n=9）骨髓单个核细胞的自噬负性调控基因mTORmRNA水平(0.39±0.37)显著低于于对照组（n=9，1.50±1.03，P＜0.05）；中危-2/高危MDS组（n=4）mTORmRNA表达水平为1.73±1.69，高于对照组，但没有统计学差异，P＞0.05。(7)Westernblotting发现Becli