蛋白质二硫键异构酶对血小板膜蛋白ibα酶切的调控作用

《蛋白质二硫键异构酶对血小板膜蛋白ibα酶切的调控作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、SOOCHOWUNIVERSITY硕士学位论文论文题目______蛋白质二硫键异构酶对血小板膜蛋白！ba___________________酶切的调控作用—研究生姓名______吴夏指导教师姓名______________戴克胜专业名称内科学（血液病学)研究方向_____________血栓与止血论文提交日期___________2015年3月蛋白质二硫键异构酶对血小板膜蛋白Ibα酶切的调控作用中文摘要蛋白质二硫键异构酶对血小板膜蛋白Ibα酶切的调控作用中文摘要目的：本研究旨在探讨蛋白质二硫键异构酶（Proteindisulfideisomerase,PDI）在血小板膜

2、蛋白（Glycoprotein,GP）Ibα酶切过程中的调控作用。方法：从健康志愿者静脉血中通过不同转速离心后分离得到血小板。用PDI抑制剂短杆菌肽（Bacitracin）与分离得到的血小板一起温育，预处理后的血小板用佛波酯（Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA）、二丁卡因（Dibucaine）、胶原（collagen）诱导GPIbα酶切。Westernblot方法检测血小板悬液中血小板GPIbα的酶切片段糖萼蛋白（glycocalicin,GC），流式细胞术检测血小板膜表面GPIbα的表达量和血小板内活性氧（Reactiveoxygen

3、species,ROS）的变化。结果：1）健康人洗涤血小板在PDI抑制剂Bacitracin单独温育后，不会引起血小板悬液中GPIbα酶切后的片段和血小板GPIbα膜表达量的改变（P>0.05）。说明抑制血小板PDI活性，不会显著改变静息状态下的GPIbα表达量，不引起GPIbα胞外段的酶切。2）刺激剂诱导下PDI抑制剂预处理组和对照组相比，血小板膜上GPIbα酶切产物增加，血小板GPIbα膜表达减少（P<0.05）。说明抑制血小板PDI活性在刺激剂诱导的GPIbα酶切过程中能增加诱导的酶切。说明PDI参与诱导的GPIbα酶切过程，并可能在其中起负性调节作用。3）刺激剂诱

4、导下PDI抑制剂预处理组和对照组相比，血小板内ROS水平增加（P<0.05）。在诱导的血小板GPIbα酶切过程中，PDI可能参与调控GPIbα酶切过程并通过改变ROS水平进而影响血小板GPIbα胞外段酶切。I中文摘要蛋白质二硫键异构酶对血小板膜蛋白Ibα酶切的调控作用结论：上述结果表明在诱导的血小板GPIbα酶切过程中，PDI可能参与并通过改变ROS水平进而影响血小板GPIbα胞外段酶切。关键词：血小板；蛋白质二硫键异构酶；血小板膜蛋白Ibα作者：吴夏指导老师：戴克胜IITheRegulatoryEffectofProteinDisulfideIsomeraseonPla

5、teletGPIbαEctodomainSheddingAbstractTheRegulatoryEffectofProteinDisulfideIsomeraseonPlateletGPIbαEctodomainSheddingAbstractObjective：ThisstudywasaimedtoinvestigatetheregulatoryeffectofproteindisulfideisomeraseonplateletGPIbαectodomainshedding.Methods:Thewashedplateletswereobtainedfromheal

6、thyvolunteers.PlateletswereincubatedwithPDIinhibitorbeforestimulationwithPMA(Phorbol-12-myristate-13-acetate),Dibucaineandcollagen.TheN-terminaldomainofGPIbαwasdetectedbyWesternblot,andGPIbαexpressionandtheintraplateletROSlevelsweremeasuredbyflowcytometry.Results：1）NeitherGCcontentnorGPIb

7、αexpressionwaschangedafterthewashedplateletsfromthehealthydonorswereincubatedonlywithPDIinhibitorBacitracin（P>0.05）.ItissuggestedthatinhibitionofPDIdoesnotaffectplateletGPIbαexpressionandalsodoesnotincreasetheamountofGC.2）ThewashedplateletswereincubatedwithPDIinhibi