葡萄vvcor27基因的克隆与抗寒功能研究

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1、？——』暴硕士学位论文＿论女题目：葡萄Ｆｉ；ａ＾７基因的克隆与抗寒功能研究，■：料，：：７８国内图书分类号Ｑ密级：公开国际图书分类号：西南交通大学研究生学位论文葡萄ＦｖＣＯｊ？２７基因的克隆与抗寒功能研究２０１２年级姓名范高韬理学硕士申请学位级别专业生物化学与分子生物学指导老师王万军教授辛海平副研究员二零一五年五月ＣｌａｓｓｉｆｉｅｄＩｎｄｅｘ；７８ＱＵ．Ｄ．Ｃ：ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＪｉａｏｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＴｈｅｓｉｓｇＭｏｌｅｃｕ

2、ｌａｒＣｌｏｎｉｎａｎｄＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＳｔｕｄｉｅｓｏｆｇＶｖＣＯＲ２７ｆｒｏｍＶｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａＧｒａｄｅ：２０１２Ｃａｎｄｉｄａｔｅ：ＦａｎＧａｏｔａｏＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｒｅｅＡｌｉｅｄｆｏｒ：ＭａｓｔｅｒｏｆＳｃｉｅｎｃｅｇｐｐＳｐｅｃｉａｌｉｔｙ：ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：ＷａｎＷａｎｕｎｐｇｊＸｉｎＨａｉｉｎｐｇＭａ２０１５ｙ，西南交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规

3、定，同意学校保留并。向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅本人授权西南交通大学可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复印手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于１．保密□，在年解密后适用本授权书；２。．不保密０，使用本授权书＂”（请在以上方框内打Ｖ）学位论文作者签名：指导老师签名：＂．力ｒ‘日期日期：乡占西南交通大学硕士学位论文创新性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师指导下独立进行研究工作所得的成果，。除文中已经注明引用的内容外本论文不包含任何其他个人或集体已经

4、发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。本学位论文的主要创新点如下：‘’Ｆ（１）以黑比诺葡萄为材料，克隆出抗寒相关基因ｖａ９ｉ？２７，为葡萄抗寒性的研究提供新的思路。２）通过启动子分析ｖａ９ｉ？２７结构和功能（、同源蛋白对比、系统发育树等分析Ｋ，挖掘ｒｖａ９；？２７的抗逆功能和冷胁迫应答机制。（３）培育超表达转基因拟南芥，测定生理指标，鉴定ｒｖａ９Ｊ？２７过表达。对植株的影响，为培育优良抗性植株提供基础和思路学位论文作者签名。＇日期：２１《占西南交通大学硕

5、士学位论文主要工作（贡献）声明本人在学位论文中所做的主要工作或贡献如下：（１）查阅国内外抗寒相关文献，在导师指导下制定实验方案和技术路线，并进行预实验，明确实验方案可行性，完善实验方案后正式开展实验。＇’（２）以玫瑰香葡萄为材料，提取了ＤＮＡ、ＲＮＡ及合成ｃＤＮＡ，克隆出了完整的编码区序列，通过生物信息学手段分析基因结构与功能。（３）通过转基因手段获得了超表达转基因拟南芥植株，通过低温处理，鉴定了转基因拟南芥的抗寒表型。（４）测定转基因株系和野生型拟南芥的抗寒相关生理指标，验证了转基因株系的抗寒性。本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师指导下独

6、立进行研究工作所得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明。一本人完全了解违反上述声明所引起的切法律责任将由本人承担。学位论文作者签名：曰期：Ｚ各？西南交通大学硕士研究生学位论文５２摘要一冬季低温是制约我国葡萄和葡萄酒产业发展的主要因素之。揭示葡萄在冷胁迫下的信号转导通路，对高耐寒葡萄、挖掘抗寒相关基因并解析其功能品种的培育具有重要理论和应用价值。ＣＯＲ基因是最先在拟南芥中发现的响应冷胁迫的转录因子，ＣＢＦ通过结合ＣＯＲ基因启动子

7、中ＤＲＥ／ＣＲＴ结构元件诱导其表达，从而增强植株抗性。＇’Ｗｔｏ本文通过对欧亚种玫瑰香葡萄（ｖｉｎｉｆｅｒａＬ．ｃｖ．ＭｕｓｃａｔＨａｍｂｕｒｇ）转录组分析一＇’鉴定了个响应冷胁迫的抗寒候选基因ＶｖＣＯＲ２７。通过对玫瑰香葡萄ＶｖＣＯＲ２７：Ｆ／基因进行分子克隆和结构分析，鉴定其抗寒功能。主要成果有克隆出了ｖＣａ？２７基因，其全长序列为２０２３，３ＫＤ，１ｂｐ，编码０２个氨基酸残基编码蛋白质大小为３发