抗寒基因ICE1的克隆与转化烟草的研究

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1、黑龙江八一农垦大学硕士学位论文抗寒基因ICE1的克隆与转化烟草的研究姓名：黄文功申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：殷奎德20060401摘要低温冷害使许多植物生存受到严重危害，全球每年因低温冷害造成的农作物损失高达数千亿元，研究并提高植物抗寒能力具有重要的理论意义和现实意义。随着人口的增长和耕地面积的不断减少，提高作物的产量越来越受到人们的广泛关注，而气候条件是影响作物产量的重要因素之一。冷害一直制约着作物产量的提高，较为严重的冷害甚至造成作物绝产，如果能培育出抗寒作物品种，就可能延长作物的生育期，也会抵御骤然低温对作物造成的不良影响，对提高作物的产量有着非常重要

2、的意义。因此，培育抗寒的作物品种无疑是一种最佳的选择。由于植物抗逆性状本身的复杂性及其与数量性状位点连锁关系的复杂性，采用传统的育神方法以获得优良品种已经十分困难。随着生物技术的发展，导入外源基因提高植物抗逆性己成为现代植物育种的主要手段。近年来转基因植物的研究取得了巨大进展，已获得转基因植物百余种，涉及50多个物种。目前，人们从拟南芥中克隆到了抗寒基因，构建植物表达载体转化拟南芥，提高了阳性拟南芥植株的抗寒性。本研究从拟南芥的RNA中克隆到抗寒基因，同时从拟南芥的基因组ⅨqA中克隆到冷诱导启动子r出劓，将JcE』分别连上caMv35s启动子和冷诱导启动子以2她，分别构建成

3、植物表达载体pBin35sICEl和pBil】rd29IcEl，二者同时通过农杆菌介导的方法转化烟草。通过抗性筛选(诱导生芽，诱导生苗，诱导生根)，移栽等过程，获得了100多棵抗性转基因再生烟草植株，通过PcR鉴定大约有“％为阳性。本研究为烟革抗寒育种提供种质资源。关键词：抗寒基因，JcE，，克隆，转化烟草AbstractLowtenlperatLIredoesh姗tosurvlValforlotsofplamsseVerely，thelossofcropscausedbylowtemperatllreisuptohundredsofbillionsImIBln廿1ewor

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5、oduction．C01ddaIIlagealwa”li商ttlleincreasingofcropsproductivi劬severecoldd啪ageevencausescmpst0dieout．Ifwewouldcultivatecropsbreedwimc01dtole啪co，nisprobableofe芏1long抽gtllesterileperiodofcmps，wllichpreventsfroInbadaffectscausedbyabrupt10wtemperatllrea11dplaySimportantr01esillimprov妇gmecropspm

6、duc60n．nismebestwaythatcropsbreedwimcoldtolerancearecultiVated．nisdi伍cu】ttogaingoodbreedby仃adi廿onalmetllodsbecauseofmeconlplic撕onofs雠ssestolerancecharacterofp1锄tsa11dmecofnplexnybeMeenitandt11esitechainrelationsofq啪廿tativechmcteLwitll吐ledeVel叩mentofbiologytcchnique，tlles吮sstolerancebyⅡ锄sfb

7、n血ngforeigngeIleshasbeco“ledomillantIm也odsfor呻rovillgmodemplantsbreed．hlrecentyears，tlIeresearchon扛螂ge面cplantsh鹊瑚deg他atadVancem蚰‘peopleh觞0b蛐edoveronehurldred1(indsof仃租坞geIlicplantsrelatedt0moremanfiftyspecies．Atpresent，pe叩Ieh船clonedc01dt01emnceJCEJby爿m6蚴捃，co地恤