油桐kar基因的克隆与功能研究

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1、:分类号;密级学校代号:10538学号;2201200165CentralSou化UniversitofForestr&Technoloyygy硕±学术学位论文油桐似基因的克隆与功能研究作者姓違:刘美兰导师姓;g:谭晓风教授培养学院:林学院学科違称:经济林研究方向:经济林栽培与育种提交日期:2015年5月StudyonCloninandFunctionalExressionofKARGenein

2、gpVerniciafordiibyLIUMeilanAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheReuirementsforthedereeofqgMasterofAgronomySupervisorProfessorTANXiaofengCentralSouthUniversitofForestrandTechnoloyygy498ShaoshanSouthRoadTianxin

3、District,ChanshaHunan410004P.R.CHINAg,Ma2015y,中表#A种我乂營学位论文原卸性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进巧研究所取得的研究成果。除了文中特别加标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品,也不包含为获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均己在文中W明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本

4、人承担。作者签名:年5月又乏日中杰挣A种栽夫令学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留,、使用学位论文的规定同意学校保留并向国家有关部n或机构送交论文的复印件或电子版,允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于:1、保密□^年解密后适用本授权书。2、不保密s/oW(请您在上相应方框打)作者签名:冷导师签名;

5、"弓年S月於曰年(月乂曰摘要油桐是中国所特有的经济林木,还被,同时也是世界上著名的工业用油树种一称为我国四大木本油料树种之。桐油的脂肪酸主要由桐酸、、栋搁酸、硬脂酸油酸一、亚油酸等组成,其中桐酸的含量最高,达70%W上,是种优质的工业使一。用油在油桐种子脂肪酸生物合成代谢的过程中,包括系列调控生理生化代谢过程的酶和基因,其中包含最主要的FAS和FAE两个复合酶系统。本研究是W油桐1’品种不同发育时期种子为材料葡萄桐,在已构建的转录组数据库的基础上,对FAS中袖桐底基因

6、进行全长cDNA克隆和功能研究,从而对油桐脂肪酸生物合成途径和油桐及油料树种的遗传改良提供科学依据。主要研究结果如下:‘’1、油桐亿4乂基因的克隆及生物信息学分析。油桐葡萄桐品种成熟种子-PC民-ACP还原似i?基因为材料,采用普通扩增技术克隆获得油桐P丽脂酷酶fKARl和巧K1AR2enBank:家族的两个成员,并将其分别命名为f(G登录号_JKF025646,KF025647)。巧JCAR1和皆JCAR2的ORF长度分别为993bp和903bp,35成32证

7、)所编码的蛋白质分子量分别为和,等电点分别为9.28和9.11,综合^_KAR1和巧1KAR2的脂肪系数与总平均亲水性来分析可推测两基因编码的蛋白都为疏水性蛋白。KARM基酸巧JCAR1存在1个跨膜域和1个疑似跨膜域,PyKAR存在2个疑似跨膜域。F/KAR1和CAR2都含有叶绿体转运肢和多__皆J个活性位点?、NADCA民10aa256aa和CAR2(巧结合位点,巧J蛋白序列的9巧J?59aa225aa蛋白序的都是短链脱氨还原酶蛋白的保守区域,属于短链脱氨酶还原酶(SD民)家庭成员

8、。巧JCAR1和巧JCAR2蛋白的二、三级构分析发现它们主要W、amoa螺旋和P折叠为主,它们的结构中也由两个右手螺旋的ppaptif组AR?成C1CAR2氨基酸序列与其他物种的同源性在的82%之间,。巧J和巧J巧JCAR1和皆JCAR2相似性仅有74%。综合W上生物信息学分析可推断巧1KAR1和^_KAR2确为油桐亿4乂基因家族的两个成员。2、油桐足4乂基因在油桐不同组织和不同发育时期的表

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