富硒长双歧杆菌优势菌株筛选及发酵工艺研究

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1、学校代码：10270分类号：Q93学号：152200850硕士学位论文富硒长双歧杆菌优势菌株筛选及发酵工艺研究学院：生命与环境科学学院专业：微生物学研究方向：微生物药学研究生姓名：王白鸽指导教师：陈代杰完成日期：二零一八年五月ShanghaiNormalUniversityMasterDissertationStudyonscreeningandfermentationprocessofdominantstrainofBifidobacteriumselenium-enrichedDepartm

2、entCollegeofLifeandEnvironmentSciencesMajorMicrobiologyResearchFieldPharmaceuticalMicrobiologyNameBaigeWangSupervisorProfessorDaijieChenCompleteDataMay2018上海师范大学硕士学位论文摘要摘要双歧杆菌(Bifidobacterium)是1899年由法国学者Tissier从母乳喂养的婴儿粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌。它是人体内具有益生功效的

3、优势菌群，在维持和提高免疫力、促进人体发育、延缓机体衰老、以及抗肿瘤等方面有非常重要的作用，双歧杆菌已成为人体健康的重要指标之一。硒是人体必需的微量元素，具有干预各种癌症的作用。无机硒、有机硒及元素硒是硒的几种主要存在形式，有机硒，元素硒及无机硒三者的生物利用度依次下降，而毒性依次提高。微生物转化硒产品除低毒性和生物利用度高的特点之外，还具有一系列对于人类有益的功效，因此开发富硒长双歧杆菌具有巨大的前景。本文通过富硒长双歧杆菌高通量筛选培养，利用长双歧杆菌生理代谢特点将培养液中无机硒转化为有机硒

4、，从而获得更高生物利用度的富硒长双歧杆菌，通过对7L罐发酵条件以及冻干条件的进一步优化，得到硒蛋白含量高的富硒长双歧杆菌。首先，通过采用96孔深孔板微型化培养和酶标仪检测，建立一种快速、高效的富硒长双歧杆菌高通量筛选技术，采用初筛与复筛、富硒驯化初筛与复筛及摇瓶验证相结合的方式，筛选到一株富硒长双歧杆菌菌株XBL-20。与原始菌株相比，其摇瓶发酵活菌数提高了3倍，罐发酵活菌数约提高了4.4倍，且多次传代均能维持在较高活菌水平。其次，通过对发酵种子、发酵培养基成分、7L罐培养条件、冻干条件以及亚硒

5、酸钠添加条件的优化，最终得到硒蛋白含量高的富硒长双歧杆菌。经过条件摸索后已经连续发酵3个批次，获得硒蛋白含量高达85%以上富硒长双歧杆菌。关键词：长双歧杆菌高通量筛选技术耐硒驯化发酵工艺IShanghaiNormalUniversityMasterofScienceAbstractAbstractBifidobacteriumisananaerobicgram-positivebacteriumisolatedfrombreastfedinfantfaecesbyFrenchscholarTis

6、sierin1899.Bifidobacteriumisadominantbacteriagroupwithprobioticeffectinhumanbody,whichplaysaveryimportantroleinmaintainingandimprovingimmunity,promotinghumanbodydevelopment,delayingbodyaging,andanti-tumor.Bifidobacteriumhasbecomeoneoftheimportantinde

7、xesofhumanhealth.Seleniumisanecessarytraceelementinhumanbodyandhastheeffectofinterferingwithvariouskindsofcancer.Inorganicselenium,organicseleniumandelementalseleniumarethemainformsofselenium,organicselenium,elementalseleniumandnoseleniumThebioavaila

8、bilityofmachine-seleniumdecreasedinturn,whilethetoxicityincreasedinturn.Inadditiontothecharacteristicsoflowtoxicityandhighbioavailability,microbialtransformationofseleniumproductsalsohasaseriesofbeneficialeffectsforhumanbeings,sothedevelopmentofBifid