羊种布鲁氏菌015株gmd、per和manb缺失株的构建及诊断抗原反应原性评价研究

《羊种布鲁氏菌015株gmd、per和manb缺失株的构建及诊断抗原反应原性评价研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、■＇■＇＇＇？．＂＾＇■■－■－＇＇＇＾．－－＾．／：／ｉ：：：：：Ｉ．：；ｒ．．ｖ；；｜ｖ：－＇‘＇Ｉ＇＇＇．记；．；记毅吃，难＇产．．＾．城气＇．、一慕巧箱端－＇．＇一Ｖ，，＇：、：分类号：式密级Ｖ．．声吗蘇：；ｒ；—＇切而．二、＇’：，．：码：１０７５９寸‘刀学号：２０１２１０８０２９单位代方；＇．．＇＇．．户．‘＇＊．ＶＶ＇ｉ去请斯．，．；，ｉ、於麵學謡瑪Ｆ石河子大学異乃磅讀編．．动．硕±学位论文．軒１＊囊議謙Ｖ？．．？？＇－．，，Ｖ，？／；！＞．義裴羊种布鲁巧

2、菌０１５株ｇｍｄ、ｐｅｒ和ｍａｎｂ缺失株的＇＇－：硏究Ｉ：：＾，：构建及诊断抗原反应原性评价．‘．．－．．．令．１和一靖，Ｗ一．”．易辕武＇－作巧？知．兰学位中请人Ｖ：ｉ鶴誦．？－一ｔ‘。农子硕去‘．挨接—：．堅人申请学位ｎ类级别游詞—？．预防兽医子，酶紧Ｖ麵学科、专业名称．卢巧補＇子生研究方向鋪齡胃／，１；——＂—私品品》＾瞧蠢義，所在学晓識；．．．石河子．中国新疆ｉ－；音期雜顏％：我鳥．—．云‘：心２０１５１０月貫：式您曾唤Ｖ．．年煞；ｒｖ／讀ｉ＇？．．．？！．Ｔ若游嫌讓驗孩

3、诗．｜禱４；巧疆？，奪｜榮分类号：密级：学号：2012108029单位代码：10759石河子大学硕士学位论文羊种布鲁氏菌015株gmd、per和manb缺失株的构建及诊断抗原反应原性评价研究学位申请人易德武指导教师陈创夫教授申请学位门类级别农学硕士学科、专业名称预防兽医学研究方向畜禽病原分子生物学所在学院动物科技学院中国·新疆·石河子2015年10月ResearchonConstructionandImmunogenicityofΔgmd,ΔperandΔmanbMutantStrainsofBrucellaMelitensis015ADissertationSubmitte

4、dtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofAgricultureByYiDewu(PreventiveVeterinaryMedicine)DissertationSupervisor:Prof.ChenChuangfuOctober,2015石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创牲声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人己经发表或撰写过的。

5、己在文中作了明确的说明并表研究成果对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均示谢意。：曰研究生签省：时间年月。秦抑如／含／／义使用授权声明本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主管部口或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供栓索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。、：研究生签《：濟德新时间年月义。曰ｉ／／导师签葦：為时间：年月曰夸方。化／么。下｜课题来源国家国际科技合作

6、专项项目名称：新型布鲁氏菌疫苗制备技术的引进与应用项目编号：2013DFA32380摘要布鲁氏菌病是一种人畜共患疾病，对畜牧业和人类健康构成了巨大威胁，被列为B类传染病。目前还没有人用布病疫苗，主要是通过布鲁氏菌弱毒活疫苗接种动物来防控布病。目前大多数动物布病疫苗为光滑型的减毒活疫苗，毒副作用较大、无法区分自然感染和人工免疫等不足。布鲁氏菌的致病机制还不完全清楚。脂多糖(LPS)是布氏杆菌非常重要的毒力因子，具有较强的抗原性。根据现有的研究表明，LPS的完整性与其胞内存活、增殖和毒力等密切相关。gmd、per和manb都与光滑型布鲁氏菌的LPS的生物合成过程有关。这些基因的缺失

7、可以导致光滑型布鲁氏菌变为粗糙型布鲁氏菌。目的：本研究通过同源重组缺失了羊种布鲁氏菌生物3型流行株015的gmd，per和manb基因，构建相应的粗糙型缺失株；并在小鼠巨噬细胞RAW264.7和昆明系小鼠体内初步评价其毒力致弱情况，检测了免疫小鼠血清中IgG和IFN-γ水平；同时分别表达了gmd，per和manb蛋白，Westernblot验证其反应原性；旨在为研发能区分疫苗免疫和自然感染的羊种布鲁氏菌标记性疫苗提供基础材料。方法：本研究以羊种布鲁氏菌015为模板，分别克隆gmd，per和m