盐酸普鲁卡因对人白血病hl-60细胞id4基因甲基化状态及细胞增殖的影响

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1、分类号；Ｒ５５１３学校代码：１０６０１密级；公开编号：Ｙ口００２０９３遂各等资纖）ＧｍＬＩＮＭＥＤＩＣ乂ＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕±学位论文－６０细４盐酸普鲁卡因对人白血病ＨＬ胞ＩＤ基因甲基化状态及细胞增殖的影响／：！学科专业：内科学研究方向：血巧病研究生姓名：王春晓学号：Ｙ１２００２０９３学位类型：科学学位导师姓名：林文远教授—一二０五年月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取１地方外得的研究成果。据我所知，除了文中

2、特别加，论文：＾标注和致谢的中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，化不甸含未获得（注；如没有其他需要特别声明的，本栏可巧）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名；签字曰觀：知净年＾月＾日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医掌院有关保留；使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件巧磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学薪可？将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库

3、进行检索、祀编，可采用影印、缩巧或扫描等复制手段保存。盘版、学文同时国（）电子中国科学技术位讼授权中学术期刊光杂志社究所论文收录到国论文全文库》、倍息研将本学位《中优秀博硕±学位数据《国，络社。（保中学位论文全义数据库》并通过网向会公众提供信息服务密的学位论文在解密后适用本授权）书：签：年签字曰期年月曰字曰期月巧衫７＾／咬心巧么＾目录盐酸普鲁卡因对人白血病HL-60细胞ID4基因甲基化状态及细胞增殖的影响………………………………………………………………………………..1中文摘要……………………………………………………

4、…………1ABSTRACT……………………………………………………………3英汉缩略词对照表……………………………………………………………6前言…………………………………………………………………….7正文……………………………………………………………………91材料与方法...……………………………………………………….91.1细胞株……………………………………………………………….....91.2主要实验试剂…………………………………………………………....91.3主要实验仪器…………………………………………………………....101.4实验

5、方法…………………………………………………………....101.5统计学方法…………………………………………………………....222结果………………………………………………………………….242.1盐酸普鲁卡因对HL-60细胞增殖的影响………………………….242.2盐酸普鲁卡因对HL-60细胞ID4基因甲基化状态的影响……….252.3盐酸普鲁卡因对HL-60细胞ID4基因mRNA表达的影响…………….272.4盐酸普鲁卡因对HL-60细胞ID4蛋白表达的影响……………….283讨论…………………………………………………………………..3

6、03.1DNA甲基化与血液系统恶性肿瘤…………………………………..303.2ID4基因与血液系统恶性肿瘤……………………………………323.3盐酸普鲁卡因的去甲基化作用……………………………………353.4创新之处……………………………………………………………384结论…………………………………………………………………39参考文献………………………………………………………………..40附录（综述）……………………………………………………………45攻读学位期间发表的学术论文目录………………………………………….57致谢………………………………

7、…………………………………………….58盐酸普鲁卡因对人白血病HL-60细胞ID4基因甲基化状态及细胞增殖的影响中文摘要目的：研究盐酸普鲁卡因对人急性髓系白血病（AML）细胞株HL-60细胞DNA结合抑制因子4（ID4）基因甲基化状态及细胞增殖的影响，探寻白血病基因治疗的潜在靶点。方法：体外培养人AML细胞株HL-60细胞，使用不同浓度的盐酸普鲁卡因处理细胞，应用CCK8法检测盐酸普鲁卡因作用24h、48h、72h后HL-60细胞的增殖变化；采用甲基化敏感性高分辨率熔解（MS-HRM）法测定盐酸普鲁卡因作用48h后HL-60细胞ID4基因甲基

8、化程度的改变；实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测盐酸普鲁卡因作用48h后细胞ID4基因mRNA表达水平的变化；免疫印迹（WB）法测定盐酸普鲁卡因作用48h后细