白介素-37对转化生长因子-β1活化的人肝星状细胞的影响

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1、中图分类号：R57S硕士学位论文白介索_37对转化生长因子_01活化的人肝星状细胞的影响院（系)、所临床医学皖研究生姓名m小学科、专业内科学导师姓名邓存良教授二〇—五年五月四川医科大学硕士学位论文目录1白介素-37对转化生长因子-β1活化的人肝星状细胞的影响………………………………………………………………11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………41.3前言…………………………………………………………81.4材料与方法……………………………………………………1

2、21.5结果……………………………………………………………231.6讨论……………………………………………………………371.7结论……………………………………………………………441.8参考文献………………………………………………………451.9英汉缩略词对照表……………………………………………492致谢……………………………………………………………503IL-37抗肝纤维化作用研究进展（综述）…………………52四川医科大学硕士学位论文白介素-37对转化生长因子-β1活化的人肝星状细胞的影响摘要目的：1.利用重组人白细胞介素-37

3、（interleukin-37，IL-37）和转化生长因子-β1（transforminggrowthfactor-beta1，TGF-β1）同时干预人LX2-肝星状细胞（LX2-hepaticstellatecell，LX2-HSC），观察重组人IL-37对TGF-β1诱导活化的人LX2-HSC的增殖及凋亡的影响，并观察其对人LX2-HSC表达的I型胶原蛋白（collagenI，Col-I）、III型胶原蛋白（collagenIII，Col-III）的影响。2.初步探讨重组人IL-37抗肝纤维化的作用及机制。方法：1.细胞培养：以

4、RPMI-1640培养基培养人LX2-HSC。2.实验分组：（1）空白对照组（A组）：只含有RPMI-1640培养基；（2）实验对照组（B组）：含TGF-β15ng/ml，不含重组人IL-37；（3）实验组（C组）：含TGF-β15ng/ml、重组人IL-37100ng/ml；（4）实验组（D组）：含TGF-β15ng/ml、重组人IL-37200ng/ml；（5）实验组（E组）：含TGF-β15ng/ml、重组人IL-37400ng/ml。3.检测人LX2-HSC的细胞吸光度并计算细胞增殖抑制率，检测细胞凋亡率及Col-I、Col

5、-III的表达：在各组不同浓度重组人IL-37作用下的人LX2-HSC分别培养12h、24h、48h后，用MTT法检测人LX2-HSC的增殖情况，测量各组细胞吸光度，并通过细胞吸光度计算各组细胞增殖抑制率；AnnexinV-FITC/PI双染细胞后用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率；相同方法培养人LX2-HSC，收集药物处理后的细胞上清液，用酶联免疫吸附实验-1-四川医科大学硕士学位论文（ELISA法）检测培养细胞上清液中Col-I及Col-III的浓度。4.统计学处理：两个随机独立样本均数比较用t检验；多个样本均数比较用单因素方差分析

6、；多个样本均数之间的两两比较用LSD法；结果均以P<0.05为有统计学差异。采用SPSS17.0的统计软件分析所有数据。结果：1.对人LX2-HSC的增殖抑制作用：在重组人IL-37与TGF-β1共培养12h、24h、48h后，各时间点A组与B组细胞吸光度比较，有统计学差异（P<0.05），且B组细胞吸光度高于A组；B组、C组、D组、E组细胞吸光度及增殖抑制率比较，有统计学差异（P<0.05），且随着重组人IL-37浓度增加，各组细胞吸光度降低，细胞增殖抑制率增加；12h和24h时C组与D组、E组的细胞吸光度及细胞增殖抑制率比较均有

7、统计学差异（P<0.05），D组与E组的细胞吸光度及细胞增殖抑制率比较均无统计学差异（P>0.05）；而48h时C组、D组、E组的细胞吸光度及细胞增殖抑制率比较均无统计学差异（P>0.05）。相同药物浓度组各时间点的比较，结果显示各药物浓度组在各时间点的细胞吸光度及细胞增殖抑制率比较均有统计学差异（P<0.05），且随着培养时间延长，各组细胞吸光度降低、细胞增殖抑制率增加。2.对人LX2-HSC凋亡率的影响：各时间点A组与B组细胞凋亡率比较，有统计学差异（P<0.05），且B组细胞凋亡率低于A组；B组、C组、D组、E组的细胞凋亡率比

8、较，有统计学差异（P<0.05），且随着重组人IL-37浓度增加，各组细胞凋亡率增高；12h和24h时C组与D组、E组的细胞凋亡率比较均有统计学差异（P<0.05），D组与E组的细胞凋亡率比较均无统计学差异-2-四川医科大学硕士学位论