α-亚麻酸对转化生长因子β1所诱导肝星状细胞影响

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1、温州医学院硕士学位论文目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2Abstract⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..16附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯一24小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31综述参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯~36学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..39温州医学院硕士学位论文缩略词表ALAcc·linolenicacid5-亚麻酸BSADMSO

3、ECMELISAHSCIGF.1IL.1LDLMFBMTTBovineserumalbuminDimethylsulfoxideExtracellularmatrix牛血清白蛋白二甲基亚砜细胞外基质Enzyme—linkedimmunoadsordentassay酶联免疫吸附试验HepaticsatellitecellInsulin-likegrowthfactorInterleukin—lLow-densitylipoproteinMyofibroblast3一(4,5一Dimethylthiazo-2·y1)一2,5-di

4、phenyl-tetrazoliunbromidebromideNAFLDNon.alcoholicfattyliverdiseaseNF.v.BODPBSPDGF0【.SMATGF-BlTNF.nWBNucleartranscriptionfactorkappaBOpticaldensityPhosphatebuffersolutionPlateletderivedgrowthfactor0【.smoothmuscleactinTransforminggrowthfactor-plTumorNecrosisFactor.0【

5、Westernblot肝星状细胞类胰岛素样生长因子自介素.1低密度脂蛋白肌成纤维细胞3一(4,5·二甲基噻唑一2)-2,5一二苯基四氮唑溴盐非酒精性脂肪性肝病核转录KB吸光度磷酸盐缓冲液血小板衍生生长因子8,平滑肌肌动蛋白转化生长因子p1肿瘤坏死因子n蛋白质印迹法按首字母顺序排列温州医学院硕士学位论文u.亚麻酸对转化生长因子’131所诱导的肝星状细胞的影响中文摘要【目的】:1.利用a.亚麻酸(ALA)及转化生长因子B1(TGF.p1)同时干预肝星状细胞(HSC),探讨干预前后HSC增殖及分泌功能。2.比较干预后各计量对增殖及分

6、泌功能影响程度,并探讨其可能的作用机制。【方法】:1.采用活化的肝星状细胞作为研究模型,将传代的细胞分为5组,分别是A组(空白对照组)、B组(TGF-1315ng/m1)、C组(TGF—p15ng/ml+ALA50mmol/L)、D组(TGF一1315ng/ml+ALA150mmol/L)、E组(TGF一1315ng/ml+ALA250mmol/L)。2.MTT比色法检测0l一亚麻酸对HSC的增殖效应,并确定Ⅱ.亚麻酸的有效浓度。3.细胞贴壁培养24小时后,分组加入不同试剂及MTT液培养4小时,以MTT法检测细胞增殖活性。4.

7、经上诉分组及处理,收集药物处理后上清液,以ELASA法检测细胞培养上清液中I型及III型胶原的含量。5.收集各组细胞以Westernblot法检测ALA对TGF.B1诱导的HSC表达的Q一平滑肌肌动蛋白(G【.smoothmuscleactin,u.SMA)的影响。【结果】:(1)组间比较F=25.07,P<0.05,差异有统计学意义。LSD法多重比较可以发现ALA对HSC的增殖有抑制作用(B、C、D、E四组各组间差异有统计学意义,尸<0.05,A组与E组间差异无统计学意义,尸>0.05),并呈剂量依赖性,A组与E组间无统计学

8、差异可能为ALA对HSC的抑制作用与TGF.131对HSC的增殖作用相互抵消所致。TGF.B1对HSC的增殖有促进作用(A组与B、C、D组比较,P<0.05)。(2)I型及III型胶原蛋白的表达:I型胶原纤维蛋白组间比较,F=19.41,P

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