α-亚麻酸对转化生长因子β1所诱导的肝星状细胞的影响

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1、温州医学院硕士学位论文论文题目:Q一亚麻酸对转化生长因子131所诱导的肝星状细胞的影响答辩委员会主席:吕宾教授浙江省中医院答辩委员会成员:郑亮主任医师温州市人民医院金嵘教授温州医学院附属第一医院论文答辩日期:2013年5月26日温州医学院硕士学位论文目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2Abstract⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8

2、结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..16附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一24小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31综述参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯~36学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..39温州医学院硕士学位论文缩略词表ALAcc·linolenicacid5-亚麻酸BSADMSOECMELISAHSCIGF.1IL.1LDLMFBMTTBovineserumalbuminDimethylsulfoxideExtracellularmatrix牛血清白蛋白二甲基亚砜细胞外基质Enzyme—linkedimmunoadsordentassay酶联免疫吸附试验HepaticsatellitecellInsulin-likegrowthfactorInterleukin—lLow-densitylipoproteinMyofibrobla

4、st3一(4,5一Dimethylthiazo-2·y1)一2,5-diphenyl-tetrazoliunbromidebromideNAFLDNon.alcoholicfattyliverdiseaseNF.v.BODPBSPDGF0【.SMATGF-BlTNF.nWBNucleartranscriptionfactorkappaBOpticaldensityPhosphatebuffersolutionPlateletderivedgrowthfactor0【.smoothmuscleactinTransforminggrowthfactor-plTumorNecrosi

5、sFactor.0【Westernblot肝星状细胞类胰岛素样生长因子自介素.1低密度脂蛋白肌成纤维细胞3一(4,5·二甲基噻唑一2)-2,5一二苯基四氮唑溴盐非酒精性脂肪性肝病核转录KB吸光度磷酸盐缓冲液血小板衍生生长因子8,平滑肌肌动蛋白转化生长因子p1肿瘤坏死因子n蛋白质印迹法按首字母顺序排列温州医学院硕士学位论文u.亚麻酸对转化生长因子’131所诱导的肝星状细胞的影响中文摘要【目的】:1.利用a.亚麻酸(ALA)及转化生长因子B1(TGF.p1)同时干预肝星状细胞(HSC),探讨干预前后HSC增殖及分泌功能。2.比较干预后各计量对增殖及分泌功能影响程度,并探讨其可能的作

6、用机制。【方法】:1.采用活化的肝星状细胞作为研究模型,将传代的细胞分为5组,分别是A组(空白对照组)、B组(TGF-1315ng/m1)、C组(TGF—p15ng/ml+ALA50mmol/L)、D组(TGF一1315ng/ml+ALA150mmol/L)、E组(TGF一1315ng/ml+ALA250mmol/L)。2.MTT比色法检测0l一亚麻酸对HSC的增殖效应,并确定Ⅱ.亚麻酸的有效浓度。3.细胞贴壁培养24小时后,分组加入不同试剂及MTT液培养4小时,以MTT法检测细胞增殖活性。4.经上诉分组及处理,收集药物处理后上清液,以ELASA法检测细胞培养上清液中I型及II

7、I型胶原的含量。5.收集各组细胞以Westernblot法检测ALA对TGF.B1诱导的HSC表达的Q一平滑肌肌动蛋白(G【.smoothmuscleactin,u.SMA)的影响。【结果】:(1)组间比较F=25.07,P<0.05,差异有统计学意义。LSD法多重比较可以发现ALA对HSC的增殖有抑制作用(B、C、D、E四组各组间差异有统计学意义,尸<0.05,A组与E组间差异无统计学意义,尸>0.05),并呈剂量依赖性,A组与E组间无统计学差异可能为ALA对HSC的抑制作用与TGF.13

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