骨形态发生蛋白-7对肝星状细胞转化生长因子β信号转导的影响

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1、骨形态发生蛋白-7对肝星状细胞转化生长因子β信号转导的影响武鹏宇,戴立里,唐静,呙琳琳(400010重庆,重庆医科大学附属第二医院消化内科)[摘要]目的通过体外细胞实验,观察骨形态发生蛋白-7(BMP-7)对转化生长因子β1(TGFβ1)处理的肝星状细胞(HSC)增殖,活化及TGFβ信号转导的影响,探索BMP-7抗肝纤维化的机制。方法以不同浓度(80、40、20ng/ml)BMP-7及TGFβ1(5ng/ml)处理的人肝星状细胞LX-2,CCK8法检测LX-2增殖,免疫化学染色法观察α-平滑肌动蛋白(α-SMA)与Ⅰ型胶原的表

2、达,RT-PCR检测TGFβⅠ、Ⅱ型受体mRNA,Smad3、7mRNA的表达。结果经TGFβ1刺激后,LX-2增殖能力无明显改变,BMP-7(20~80ng/ml)处理后,各组LX-2细胞增殖均被抑制,高浓度时抑制更强(P<0.01)。TGFβ1可促进LX-2表达α-SMA和I型胶原,加入BMP-7(20~80ng/ml)处理48h后可抑制细胞活化和胶原表达,抑制作用随处理浓度增强而增强(P<0.01,P<0.05)。5ng/mlTGFβ1处理48h后,TβRⅠ、TβRⅡ、Smad3mRNA表达增加,Smad7mRNA表达减

3、少。BMP-7可减少Smad3mRNA表达(P<0.01),增加Smad7mRNA表达(P<0.01,P<0.05),但对TβRmRNA的表达影响无统计学意义(P>0.05)。结论BMP-7可抑制肝星状细胞的增殖和活化,减少I型胶原的表达,其机制可能为抑制TGFβ/Smad通路中Smad3mRNA表达,增加Smad7mRNA表达,从而拮抗TGFβ1的促纤维化作用。[关键词]肝硬化肝纤维化;肝星状细胞;骨形态发生蛋白质类骨形态发生蛋白;转化生长因子[中图分类号]R575.2;R285.5[文献标志码]AEffectsofBone

4、MorphogeneticProtein-7onTransformingGrowthFactorβSignalinginHepaticStellateCellsWuPengyu,DaiLili,TangJing,GuoLinlin(DepartmentofGastroenterology,SecondAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400010,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectsofb

5、onemorphogeneticprotein-7(BMP-7)onproliferation,activationandTGFβsignalinginTGFβ1inducinghepaticstellatecells,andthepossiblemechanismofanti-fibrosis.MethodsHumanHSCLX-2celllinetreatedwithdifferentconcentrationofBMP-7(80ng/ml,40ng/ml,20ng/ml)andTGFβ1(5ng/ml)wasmeasur

6、edbyCellCountingKit-8astheimpactofcellproliferation.Theexpressionsofα-smoothmuscleactin(α-SMA)andcollagenIweredetectedbytheimmunocytochemicalassay.TheexpressionsofTGFreceptorI,II(TGFβRI,TGFβRII)mRNAs,andSmad3,7mRNAsweremeasuredbyRT-PCR.ResultsTheproliferationofLX-2t

7、reatedbyTGFβ1wasnotsignificantdifferentfromthecontrolgroup,whileBMP-7inhibitedtheproliferationofLX-2inadose-dependentmanner(P<0.01).TGFβ1increasedexpressionsofα-SMAandcollagenI,andBMP-7decreasedtheexpressionsdose-dependingafter48hours(P<0.01,P<0.05).BMP-7showeditsim

8、pactsafter48hoursonLX-2ofrepressingtheexpressionincreaseofSmad3(P<0.01)anddecreaseofSmad7(P<0.01,P<0.05)mRNAinducedby5ng/mlTGFβ1inadose-de

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