猪肺炎支原体诱导猪肺泡巨噬细胞基因差异表达谱研究

《猪肺炎支原体诱导猪肺泡巨噬细胞基因差异表达谱研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、ｐ＾（＾ｉｔ＇■博：ｔ学位论文猪肺炎支原体诱导猪肺泡巨隧细胞基因差异表达谱研究研究生姓名王贵平指导教师余兴龙学科专业临巧兽睽酱研究方向动物疫病发病机理与防将分类号密级＿＿＿＿＿ＵＤＣ１０５３７单位代码觸斋农足乂營博：ｔ学位论文猪肺炎支原体诱导猪肺泡巨瞧细胞基因差异表达谱研究Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｎｅｅｘｒｅｓｓｉｏｎｒｏｆｉｌｅｓｔｕｄｏｆｇｐｐｙｏｒｃｉｎｅａｌｖｅｏｌａｒｍａｃｒｏｈａｅｉｎ

2、ｄｕｃｅｄｂｐｐｇｙＭｙｃｏｐｌａｓｍａｈｙｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ研究生姓名王贵平指导教师余兴龙学科专业临巧兽医学研究方向动物疫病发病机理与防控论文答辩日期２０１４年１２月１５日答辩垂员会主席论义评閱人？主ｔｉ壬叫衣終秦支■為成怎ｊｙ二０—四年十二月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖南农业大

3、学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明碗的说明并表示了谢意。＾＇＾研究生签名￣＾年／切２：时间；於日关于论文使用授权的说明本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即；学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。（保密地学位论文在解密后应遵守此协议）

4、／＾研究生签名：时间：年巧日Ｗ指导教师签名时间：兴年化月日摘要摘要一猪支原体肺炎（ＭＰＳ），是种由猪肺炎支原体（Ｍｈｐ）引起的猪慢性呼吸道病。ＭＰＳ在世界范围内流行，在我国也长期存在，严重影响了养殖业的发展。ＭＰＳ逐渐被、国内外研究学者所重视，对其研究的相关报道也较多，这些报道多集中在疫苗开发病原学、、药物及诊断方面。ＭＰＳ典型病理变化包括支气管周围炎、淋己细胞浸润增生肺肉变和间质性肺炎等；典型临床症状包括喘气、消瘦及恶病质等。ＭＰＳ典型病理变化和临床

5、症状发生机理、相关信号传导途径及相关细胞因子在疾病发生过程中的作用较少见到相关文献报道。本试验将从下列两方面进行研究。１、长沙市及周边地区ＭＰＳ病原流行病学调查。从长沙市及周边地区采集了口６０１４６９份份猪样品：鼻拭子４５份８份，支气管肺泡灌，猪肺６２５份和，气管拭子洗液血液４０份。对采集的样品用ＰＣ民和序列分析的方法进行了猪肺炎支原体（Ｍｙｃｏ／化ｓｍｆｌ’Ｍｈ）和（Ａｃ舶ｓｗａｏｒ／ｎＭｈｒ）Ｍｈｒ进行ｐ猪鼻支原体ｆｙ巧砂咕Ｍ检测；对了分离并初步鉴定。结果表明，Ｍｈｐ和Ｍｈｒ

6、在长沙市及周边地区猪群中，最佳待检样品是；冬季收集的屠宰猪支气管肺泡灌洗液（Ｍｈｐ）和猪鼻拭子（Ｍｈｒ）。本研究结果为长沙市及周边地区ＭＰＳ防制及Ｍｈｐ和Ｍｈｒ检测提供了新的流行病学依据。２、猪肺炎支原体诱导猪肺泡巨嗤细胞基因差异表达谱研究。本试验用Ｍｈｐ刺激－体外培养的ＰＡＭ，ＷＲＰＭＩ１６４０培养液赔育ＰＡＭ为对照，分别作用１２ｈ和２化后提ｃＤＮＡ，取细胞总ＲＮＡ，构建文库用数字基因表达谱（ＤＧＥ）技术对其进行检测并对检测结果进行了ＧＯ分析、ＫＥＧＧ分析、ＩＰＡ分析和Ｓ

7、ＴＲＩＮＧ分析。结果显示，与对照组相比，Ｍｈｐ诱导ＰＡＭ１２小时后ＰＡＭ转录组中有８６个基因显著差异表达，其中４９个表达上调，３７个表达下调；Ｍｈｐ诱导ＰＡＭ２４小时后ＰＡＭ转录组中有８８９个基因显著差异表达，其中５１７个表达上调，３７２个表达下调。‘‘ＧＯ分析发现Ｍｈｐ诱导ＰＡＭ口小时后差异显著ＧＯ富集项有５４项：１、生物进＂＂、２、程类别：４６项，功能描述主要为炎症反应免疫应答和信号传导控制等分子功；＂＂能类别，功能描述为细胞因子活性、细胞因子受体结合和ＴＮＦ受体结合３

8、、细；５项；＂。胞组分类别：３项，功能描述为细胞周边（细胞外间隙，充满细胞外基质和细胞外液）＂＂ＧＯ分析发现Ｍｈ诱导ＰＡＭ２４小时后差异显著ＧＯ富集项有１２８项：１、生物进程ｐ类别：１０６项，功能描述主要为；炎症反应、免疫系统活性、防御反应、免疫应答和白＂＂细胞激活等；２、分子功能类别有１１项，功能描述主要为；趋化因子活性、趋化因‘‘＂子受体结合、蛋白结合和催化活性等；３、细胞组分类别有１１项，功能描述主要为：Ｉ