猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白诱导猪肺泡巨噬细胞白介素-10表达的分子机制研究

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1、分类号：单位代码：１０４２２Ｑｇ日密级：学号：２０１２１１５７７ＳＨＡＮＤＯＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕±学位论文ＴｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅ．．，，１，胃：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白诱导猪肺泡巨－隧细胞白介素１０表达的分子机制研究——ＭｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＩＬ１０ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｉｎＰＡＭｉｎｄｕｃｅｄｂｙｎｕｃｌｅｏｃａｐｓｉｄｐｒｏｔｅｉｎｏｆＰＲＲＳＶ作者姓名朱希旺培养单位生命科学学院专业名称动物学指导教师王余案教授合作导师．．２０巧年

2、５月巧日。＞言勺＾＾分类号：Ｇ单位代码：／密级：学号：山ｔ１、ｔ硕±学位论文的禱倘备论文题目：輸酔嫁裤的－ｋ級餐才＾表命、書作者姓名絲眼学院名称狂合夺＾Ｖ嗦昏扛专业名称哀令斗＾＇ｙ指导教师王全空聲Ｌ才良合作导师２０１５年丹日Ｉ原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。。〇论

3、文作者签名：斗备於日期；一Ｌ中１关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）〇个＞文〇权论文作者签名：巧扛导师签ｉ克期＾：目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ符号说明Ｖ第１章文献综巧１１．１猪繁殖与呼吸综合征１１．２ＰＲＲＳＶ分类地位及生物学特性２

4、１．２．１分类地位及形态特征２１．２．２生物学特性２１．３ＰＲＲＳＶ基因组及编码蛋白３１．３．１基因组结构３１．３．２非结构蛋白３１．３．３结构蛋白４１．３．４遗传变异６１．４ＰＲＲＳＶ免疫学反应７１．４．１先天免疫７１．４．２体液免疫８１．４８．３细胞免疫第２章本论文的研究目的与意义１０第３章ＰＲＲＳ病毒核衣壳蛋白真核表达载体的构建１１３．１材料与方法１２３丄１毒株、茵株与细胞１２３丄２主要试剂与仪器１３３丄３引物设计１３１４３丄４细胞培养与病毒扩増３丄５病毒总ＲＮＡ提取及目的

5、基因扩增１４－－ｎｅｏＮ真核表达载体的构建３丄６ｐＣＩ１６３丄７ＣＩ－ｎｅｏ－Ｎ真核载体的表达活性鉴定１９ｐ３．２结果与分析２２ｉ－３．２．１目的基因的ＲＴＰＣＲ扩增２２３－ｎ－．２．２ＣＩｅｏＮ重姐载体鉴定２２ｐ－－３ｅｏ２４．２．３ＣＩｎＮ载体表达活性鉴定ｐ３．３结论２６－－１０第４章猪正ＳＹＢＲＧｒｅｅｎＩｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ检测方法的建立２７４．１材輯和方法２８４丄１菌种及细胞２８４丄２主要试剂和仪器巧４丄３巧光定量引物的设计与合成２９４丄４ＲＮＡ提取及ｃＤＮＡ的合成２９４丄

6、５质粒柄准品的制备２９４丄６－ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ反应条件的优化３０４丄７－ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ标准曲线的建立３０－４丄８ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ敏感性试验３０－４丄９ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ特异性试验３０４丄１０－ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣ民重复性试验３０４．２结果与分析３１４．２．１质粒标准品的制备３１－４ｉｍ３１．２．２ＲｅａｌｔｅＰＣ民反应条件的优化－４．２．３ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ标准曲线的建立３１－４感性试验．２．４ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ３２敏－４ｌｉｍ３２．２．５Ｒｅａｔｅ

7、ＰＣＲ特异性分析４－．２乂ＲｅａｔｉｍｅＰＣＲ重复性试验３３４．３讨论３３４．４结论３４－１０表法第５章ＰＲＲＳＶ核衣壳蛋白诱导猪肺泡巨唆细胞白介素的分子机制．．．％５．１材料和方法３８５丄１毒株、菌株及细胞３８８５丄２主要试剂和仪器３５丄３统计学分析扣５丄４其它操作方法３９５．２结果与分析的－５．２．１ＰＲＲＳＶ核衣壳蛋白显著上调ＰＡ