枸杞多糖单用及联合cxcl10抗肝癌作用免疫机制研究

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1、分巧巧Ｒ２８５．５学校代号１０５７２ＵＤＣ６１０巧級学毎如１２１１０４３４８户抑【中聖為夫缘ＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｙ＊■＂．．．．？，ｒ■＇＇Ｉ一＇．＊－－—？＇－－硕±学位论文掏杞多糖单用及联合ＣＸＣＬＩＯ抗巧癌作用免疫机制研究＂—————Ｉ■学位申请人胡巧？Ｌ．．．．指导教师姓名何彦丽专业名称中西医结合基碱申请学位类型科学学位论文提交日期２

2、０１５年４月广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除义中已经特别加Ｗ注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已绞发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名．／曰期；年月曰＞１＾《３关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅

3、。本人授权广州中医药大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿姬论文导师签名．細胡巧＾曰期：父年月曰名［５３摘要研究目的及意义：原发性肝癌（ｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＰＨＣ）是我国最常见的消化系统恶性疾病，Ｗ其强烈的侵袭性和转移性、极短的存活率使之迅速窜升我国恶性肿瘤死亡率的第二位。由于肝癌发病的隐匿性，绝大部分患者在就诊时已处于临床晚期，无法进行手术根除

4、治疗，且由于荷瘤机体内Ｔ辅助淋巴细胞（ＨｅｌｐｅｒＴＣｅｌｌｓ，Ｔｈ）分化失衡、树突状细胞（ｄｅｒｕｌｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓ，ＤＣ）数量减少及功能缺陷，机体抗肿瘤免疫无能或低下、化疗效果及预后均差。文献报道，机体的免疫能力对恶性肿瘤的发生、发展起着重要的调控作用，免疫疗法已成为当今抗癌治疗的重中之重，如何提高荷瘤机体抗肿瘤免疫力成为目前巧癌治疗的核也问题，基于中药多糖在预防肝癌发生及减少复发，，掉抗放、化疗的毒副作用，増强免疫力延长生存期等方面的优势临床上联合中药多糖治疗肝癌的应用也越来越广泛。构杞多糖化ｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕ

5、ｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＢＰ）是中药构杞子发挥抗肿瘤作用的关键成分，大量药理实验研究表明Ｌ邮对荷瘤机体产生显著的免疫调节作用（如、调节荷瘤机体多种免疫效应细胞；Ｔ细胞细胞毒Ｔ细胞、巨曠细胞等细胞活性Ｗ及诱生多种抗癌细胞因子的功能），从而抑制肿瘤生长，但其作用于肿瘤的具体分子及免疫学机制尚未清楚ｃｈｅｍｏｋｎｅａｎｄ－。文献报道ＣＸＣ趋化因子配体ｌＯＣＣｉｌｉ１０ＸＣＬ１０）ｇ可Ｗ趋化Ｔ细胞、单核细胞和自然杀伤细胞等多种炎症细胞至肿瘤发生部位杀死肿瘤细胞，并且ＣＸＣＵ０的表达与肝炎、巧硬化、肝癌等肝脏疾病关系尤为密切，构

6、杞多一糖联合细胞因子ＣＸＣＬ１０治疗巧癌是次崭新的尝试，本实验姐在前期课题组的研究基础上，首先通过体外实验，，明确ＬＢＰ在细胞水平上对人肝癌ＨｅｐＧ２细胞生长具有，其次通过体内实验Ｌ１０抑制作用，在动物水平上探讨ＬＢＰ单用或者联合ＣＸＣ抗实验性肝癌作用及其具体的免疫学机制。方法：１体外实验：ＬＢＰ对人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２的杀伤效果及联合氣尿嚼晚的増敏作用：１．１确定ＬＢＰ对ＨｅｐＧ２的抑制效果：将ＨｅｐＧ２细胞泡悬液Ｗ３５００／孔种于９６孔板，Ｗ２０〇１１１３几，４０〇１１１３几８０〇１１１３／１，１０００雌／１四个浓度加药作

7、用于舶９６２，另设不加药组对照。ＷＭＴＴ法检测药物作用癌细胞的相对抑制率。１．２ＬＢＰ联合氣尿嗦巧的増敏作用；选用ＬＢＰ两个剂量但Ｏ０ｍｇ／Ｌ４００ｍｇ／Ｌ）联合５即（ｌｕｍｏｌ／Ｌ），另设单药及不加药对照组，ＷＭＴＴ法检测各组药物作用癌细胞抑制率，金氏Ｑ值法评定两药协同或相加效果。Ｉ２体内实验：建立实验性肝癌小鼠讯２２皮下瘤）模型，随机分为肿瘤模型组、＋＋ＬＢＰ巧Ｏｍｇ／ｋｇ）灌胃组、ＬＢＰＣＸＣＬ１０巧０ｍｇ／ｋｇ灌胃右胁皮下注射１５ｕｇ／ｋｇ）组、ＣＸＣＬ１０（右胁皮下注射巧ｕｇ／ｋｇ）组、环磯酷胺（２０ｍｇ／ｋｇ）或氣

8、尿喀巧（５即）一（１