鲇源拟态弧菌的分离鉴定研究

《鲇源拟态弧菌的分离鉴定研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、、‘ｖｓ－，、：１学号Ｓ２０：分类号Ｓ９４１．４１２６ｎ〇四川农化大学专业硕±学位论文．？．站源拟态弧菌的分离鉴定研究＊－Ｖ－－Ｖ、＇＊韩帅？＊＇广，、－＼指导教师耿毅教授、校外导师刘冲高级工程师．．，学位类别兽医硕±．＇领域名称基础兽医学研究方向水生动物疾病－５含＂＇＇－二、，、－：■、■■扣．＇．、‘．户、一斬＊—１—？一，Ａ？一■、．

2、户乂产Ｖ、２０１５年５月■二－‘＇＇＇兵．＊’，？一‘－■＼，。■■、，．’＇、、＇ｒ４ｒ；“’．．４．？；．＂？、，ｔｏ．Ｃｌａｓｓｉ１．４１ＳｔｕｄＮｒ２０１１ｉｆｃａｔｉｏｎＮｕｍｂｅｒＳ９４ｅｎｔｕｍｂｅＳ１２６０ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａｓｔｅｒＤｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ巧Ｓｔｕｄｙｏｎｉｓｏｌａｔｉｏｎ

3、ａ打ｄｉｄｅ凸ｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＦｉｆ＆ｒｚＶ？ｍｉｍｉｃｕｓｆｒｏｍｆｒｅｓｈｗａｔｅｒｃａｔｆｉｓｈＢＨａｎＳｈｕａｉｙＤｉｒｅｃｔ：ｅｄｂＰｒｏｆ．ＧｅｎＹｉｙｇ（Ｍａｓ化ｒｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙ）ＣｏｌｌｅｅｏｆＶｅｔｅｒｉ田ａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｉｃｈｕａｎ乂ｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙｇｙＣｈｅｎｄｕＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅＰ．Ｒ．Ｃｈｇ，ｉｎａ，Ｍａ２０１５ｙ，论文独创性声

4、明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加化际注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料一。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。＾研巧生签名：口年＾月／曰奔叶衣ａｔ关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并

5、向圍家有关部口或机构送烫论文的复印件和电子版Ｉ允许论文被査阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不圖媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。＇＾本论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＿＿＿＂＂（请在从ｉ：□内划Ｖ））研究生签名；為叶ｗｆ年《月八曰一＾导师签名：乂己ｗＫ＾月／去＿年日＾中文摘要？２０，，１２年ｙ、来四川各地南方钻和沟钻的养殖场常爆发种Ｗ体表出现视色斑背部、腹部肌－，臀健与尾

6、罐基部出血为特征的传染病２０１２２０１４，肉出现明显的长方状溃瘍化。年间从四川各—４０３－ＳＣＣＦ０６钻鱼养殖区自然感染发病的南方解和沟站体内分离到株（ＳＣＣＦ）Ｇ弧形，极生单°鞭毛短杆菌。在ＴＳＡ平板于２８Ｃ培养４化，形成表面光滑，边缘整齐，微隆起，乳白色的圆形菌落，在鉴别培养基ＴＣＢＳ上则形成绿色菌落。在光学显微镜下，４分离菌呈ＣＴ短杆菌，茜体稍弯，呈；生理生化特性与弧茜属细菌极为相似弧形或逼点状；电镜下可见菌体极生单鞭毛。根据’（Ｊ＾ｎｏｓ）１６ＳｒＤＮＡ与巧序列分析表

7、分离菌株的形态学和生理生化轉性初步判定其为弧菌ｐ；ｇｙ６ＳＤＮＡ序列（ＫＣ５０３０５７、ＫＣ５０３０５９、ＫＫ）０１８２２、ＫＦ９０７１２７）与ＧＢ扣ｋ中Ｔ＇ｃ；＾ｏｋｒ幻ｅ明，４分离株ｒｅｎｌ１１化ｒＤＮＡ序列同源性最商！而留曲序列（ＫＣ５０３０５８、ＫＣ５０３０６０、ＫＣ５０３０５４、扮ＦＷ８％９）与’’Ｋｒａ／ｍＣＭｓｇｒＢ序列同源性最高。在抖分离菌１６ＳｒＤＮＡ序列及其ＧｅｎＢａｎｋ中同源性较商的相关ｙ’’一＂ｗｒａ序列构建的系统发育树上，４分离菌与ｃＡｏ似ｆｌｃ和Ｋ

8、ｃｗｒＢＴ聚为族；在Ｗｇｙ基因序列及＇ｅｎｋ一其ＧＢａｎ中同源性较富的相关序列构建的系统发育树上，４分离株与ＫｗｉｗＨｃＭｓ聚为族。在基于弧菌系统发育标志性鉴别基因ｄｎｏ／的双重ＰＣＲ检测中，４分离株基因组ＤＮＡ中巧特异性扩一致增出大小约为７７ｂ，，进而鉴定４株分离菌为Ｋｍ加扣趴１ｐ条带与预期Ｋ扩増片段药物敏感性实验结果显示４株Ｆｍ細ｋｗ对链霉素、Ｔ胺卡那、氣脈酸、氣苯尼考和氧氣沙星等抗菌药物敏感，对青霉素和罗红霉素等耐药。病理学观察发现