几种养殖贝类中副溶血弧菌的分离与鉴定

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1、几种养殖贝类中副溶血弧菌的分离与鉴定何丽斌，周宸，林克冰（福建省水产研究所，厦门361012）摘要：副溶血弧菌(VibrioParahaemolyticus)是一种致病性嗜盐菌，常引起人类食物中毒。通过对三种不同贝类的检测均发现副溶血弧菌，其中泥蚶的检出率为37.5%，僧帽牡蛎为28.0%，波纹巴非蛤为33.3%，平均检出率为30.8%。关键词：泥蚶；僧帽牡蛎；波纹巴非蛤；副溶血弧菌；分离；鉴定IsolationandidentificationofVibrioparahaemolyticusinseveralculturedshellf

2、ishHELi-bin,ZHOUChen,LINKe-bing(FisheriesResearchInstituteofFujian,Xiamen361012,China)Abstract：Vibrioparahaemolyticusisapathogenichalophile,oftencausingfoodpoisoningofhuman.Itwerefoundthroughtheidentificationofthreedifferentshellfishes,whichmudclam(Tegillarcagranosa)thede

3、tectionratewas37.5%,28.0%ofSaccostreacucullata,33.3%ofPaphiaundulata,theaveragedetectionratewas30.8%.Keyword：Tegillarcagranosa;Saccostreacucullata;Paphiaundulata;Vibrioparahaemolyticus;isolation;identification副溶血弧菌(VibrioParahaemolyticus)是一种嗜盐的革兰阴性致病菌，属弧菌科(Vibrionaceae)弧菌

4、属(Vibrio)，又名嗜盐菌、肠炎弧菌。此菌由藤野恒三郎于1950年首次在日本大阪发生的暴发性海产食物中毒事件中分离得到[1]；由坂崎氏在1963年正式命名为副溶血弧菌[2]。副溶血弧菌是引起食源性疾病的重要病原之一[3]，可导致患者出现腹泻、腹部痉挛、恶心、呕吐、发热，甚至脱水、昏迷等症状。1998年以来的资料显示，副溶血弧菌引发的食物中毒的发生规模及人群暴露规模呈明显上升趋势，均已超过沙门氏菌食物中毒，跃居首位[4]。副溶血弧菌广泛分布于海湾、海岸线区域、盐湖及海产品中，温热地带较多。该菌引起的食物中毒是近20年才被发现和重视的，是

5、我国沿海地区夏、秋季食物中毒和急性腹泻的主要病原菌，该菌在海水中可存活47d，淡水中可生存2d，夏季海产品的平均带菌率高达94.8%[5]。在夏秋季节的沿海地区，经常由于食用污染大量副溶血弧菌而又未经良好加工处理的海产品而引发突发性食物中毒[6]。近些年来，每年都有该菌引起食物中毒的报道，尤其是在南方和沿海地区较为常见，一般4～6月和8～10月两个汛期为发病高峰。引起中毒的食品主要为海产鱼、虾、贝类，其次为肉类、家禽和咸蛋，偶尔也可由咸菜引起。目前，副溶血弧菌引起的食物中毒在细菌性食物中毒中的比例较高，其危害程度仅次于沙门氏菌、大肠杆菌、

6、葡萄球菌和肉毒梭菌[1]，而在沿海地区的食物中毒病例中，该菌已成为首要病原。近年来，由于海产品倍受广大消费者青睐，由它引起的食物中毒也时有发生，因此，对水产品进行副溶血性弧菌检验具有重要的实际意义，加强对海产品中副溶血弧菌的监测具有重要的公共卫生意义。1材料与方法1.1样品2003年8月泥蚶(Tegillarcagranosa)、僧帽牡蛎(Saccostreacucullata)、波纹巴非蛤(Paphiaundulata)等取自泉州、厦门、漳州等沿海养殖区。1.2主要培养基及试剂培养基和试剂：氯化钠结晶紫增菌液、3.5%灭菌盐水、嗜盐菌选

7、择性琼脂、SS琼脂、氯化钠蔗糖琼脂、3.5%氯化钠三糖铁琼脂、嗜盐性试验培养基、生化试验培养基、甲基红试剂、靛基质试剂、V-P试剂及各种糖发酵管等购自杭州天和微生物试剂有限公司。1.3仪器STOMACHER-400拍打式匀浆器、OLYMPUSBX-50高级系统生物显微镜1.4检验方法参照GB4789.7-1994食品卫生微生物学检验副溶血弧菌检验1.4.1增菌培养以无菌操作取样品(全肉)25g，加入225mL3.5%灭菌盐水，用匀浆器均质2min，接种于嗜盐菌选择性琼脂平板和SS琼脂平板各二皿，同时取l0mL加入到100mL氯化钠结晶紫增

8、菌液中，放于37℃培养8h后，接种上述平板，于37℃培养24h后取出观察。1.4.2分离培养取平板中可疑菌落，转接3.5%氯化钠三糖铁斜面、氯化钠蔗糖琼脂平板及SS琼脂平板，37℃培养24h后