野油菜黄单胞菌hpaa基因功能的研究

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1、学校代码：学号：分类号：密级：潘大營硕士学位论文题目：野油菜黄单胞菌基因功能的研究作者：邹俊指导教师：何朝族教授专业：生物化学与分子生物学ThefunctionalstudyofhpaAgeneinXanthomonascampestrispv.campestrisAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinScienceByZouJunSupervisor:HeChao-zuMajor:BiochemistryandMolecularBiologySubmittedtime:May,

2、2015海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以为存在馆际合作关系兄弟高校用户提供文献传递服务和交换服务。本人授权海南

3、大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名导师签名日期：年月巧日日期本人己经认真阅读“高校学位论文全文数据库发布章程同意将本人按“章程”的学位论文提交“高校学位论文全文数据库”中全文发布，—中规定享受相关权益。同意论文提交后滞后：口半年；□一年：年发布。论文作者签名：导师签名曰期：；年月曰期卞七年月外日摘要野油菜黄单胞菌把大量的功能各弁或相似的效应蛋运送到植物体内以利于细菌的侵染和繁殖，引起十字花科作物黑腐病，造成经济作物的大范围减产、品质下降、带来了巨大的经济损失和资源

4、浪费。蛋白是一个广泛存在于黄单胞菌中的效应蛋白，先前的研究表明在辣椒斑点病病原菌中’被证明是一个型效应蛋并且参与其他效应蛋的分泌过程。然而在中，蛋白的作用机理和功能并不十分清楚。本文利用与植物互作的模型，通过基因敲除及接种实验发现对于在甘蓝、萝卜、菜、拟南芥上的全毒性是必须的，对于在烟草上引起的也是必须的。进一步的研究表明能与发生互作，并且可以影响、、、、、等蛋白的分泌过程，但不能与这些蛋发生互作。通过证实了的分泌依赖于的型分泌系统的结构基因，暗示着也可能作为一种型分泌效应蛋白来发挥功能的。亚细胞定位表明定位于植物细胞核，并且末端和末端各具有一个核定位序列。荧光素酶双报告分析系统显示

5、可以促进诱导的标签基因的表达。通过构建如的拟南芥转基因植株发现，可增强植物体内的活性氧爆发以及胼胝质沉积，减弱和及在拟南芥上发黄的表型。关键词：野油菜黄单胞菌；型分泌系统；植物先天免疫AbstractXanthomonascampestrispvcampestrissecretealotofeffectorsintoplantstofacilitatebacterialinfectionviathetypeIIIsecretionsystem，，，，，，，，，目录黄单胞菌概述植物先天免疫反应诱导的植物反应效应子诱导的植物反应细菌分泌系统及效应蛋的研究进展型分泌系统的组成及调控基因的研

6、究进展本研究的目的和意义材料与方法实验材料质粒植物材料试剂培养基实验仪器及器材实验方法基因组提取质粒小量提取三亲本接合法敲除菌株的基因突变体互补菌株的构建甘蓝、萝卜、白菜、拟南芥和烟草接种标签融合蛋的纯化标签融合蛋的纯化实验蛋白分泌检测氯化铯梯度离心大量提取质粒原生质体制备及转化亚细胞定位荧光素酶双报告系统分析转基因植物的构建苯胺蓝染色观察胼坻质沉积结果与分析基因缺失突变体的构建对于在甘蓝、萝卜、白菜的全毒性是必须的对于在拟南芥上的全毒性是必须的对于在烟草上引起的超敏反应是必须的影响某些型分泌蛋的分泌与被其影响分泌的蛋不发生互作能与分子伴侣发生互作的分泌依赖于型分泌系统3.9HpaA

7、xccgcKM定位于细胞核促进诱导的标签基因的表达转基因植株的构建转基因植株可以减弱细菌在拟南芥上发黄的表型转基因植株抑制在拟南芥上的生长可增强诱导的植物体内活性氧水平可增强诱导的胼胝质沉积参考想海南大学硕士学位论文前言黄单胞菌概述黄单胞菌属的的致病细菌与植物通常是密切联系的，这中包括了很多重要的经济作物上的病原菌（。这个病原菌属的毒性通常决定于寄主的偏好性，尤其是寄主的来源，由此定义了大量的特种及其变种。黄单胞菌属根据其形态特征和其它的生理特性，被分成了