益气养血化瘀法通过调控nk细胞活性逆转大鼠肝纤维化的实验研究

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1、成都中医药大学硕止毕业论文学位论文益气养血化痕法通过调控ＮＫ细胞活性逆转大鼠肝纤维化的实验研究ＲｅｓｅａｒｃｈｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆｔｏｎｉｆｉｎｉａｎｄｂｌｏｏｄａｎｄｙｇｑｐｒｏｍｏｔｉｎｂｌｏｏｄｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎｂｒｅｕｌａｔｉｎｔｈｅＮＫｃｅｌｌｇｙｇｇａｃｔｉｖｉｔｆｏｒｒｅｖｅｒｓｉｎｒａｔｓｗｉｔｈｈｅａｔｉｃ打ｂｒｏｓｉｓｙｇｐ侯艳锋指导教师姓名：李巧教授申请学位级别：硕±专业名称；中西医结合临床（感染方向）论文提交时间；２０１５年４月论文答辩时间：

2、２０：Ｌ５年５月二〇—五年五月成都中医药大学硕±毕业论文中女摘要目的：本课题主要探讨中医药益气养血化疲法通过调控ＮＫ细胞活性来逆转大鼠。肝纤维化，为中医药益气养血化疲法逆转大鼠肝纤维化提供科学循证依据施一Ｗｔ第部分：大鼠肝纤维化模型构建。除正常雄性ｉｓａｒ大鼠作为空白组，余大鼠４０％ＣＣＬ４橄揽油混合液皮下注射（５ｍｌ／ｋｇ，２次／周，共９周），６周处死６只大鼠取肝组织动态观察肝组织ＨＥ染色、Ｍａｓｓｏｎ染色情况，造模９周处死６只大鼠采取鼠外周血用放射免疫法检测肝纤维化指标（ＨＡ、ＬＮ），并取肝右叶组织Ｅ染色－

3、进行巧组织Ｈ、Ｍａｓｓｏｎ染色，并用免疫组化染色ＳＰ法、平均光密度检测－ＳＭＡ表达水平来结果确定造模成功肝组织ａ。二。第部分：ＮＫ细胞与益气养血化療法治疗肝纤维化的相关性研巧确定大鼠肝纤维化造模成功后进行分组，第１０周停止造模并分为４组：扶正化疯胶囊治－疗组、干扰素ａ２ｂ治疗组、模型对照组、空白对照组，各组均１２只大鼠并编号后予Ｗ药物干预－２ｂ理盐水（扶正化痕胶囊、干犹素ａ），剰余两組大鼠予等体积生１２灌胃，治疗８周后停止给药禁食小时。取股动脉血检验ＨＡ、ＬＮ；通过免疫－组化的ＳＰ法－、平均光密ａＳＭＡ表达及肝组织中ＮＫ细胞数量度检测

4、肝组织中；从鼠抗凝血中分离ＮＫ细胞，并加入ＣＤ１０７ａ及ＣＤ％的抗体，通过流式细胞仪－ＴＷ检测ＣＤ１０７ａ／ＣＤ５６阳性率；并将鼠肝星形细胞（ＨＳＣ６）与分离的ｉｓｔａｒ鼠ＮＫ细胞膊育并加入ＰＩ、ＣＦＳＥ染色剂对细胞进行标记，用焚光湿微镜定性观察－－ＨＳＣＴ６被杀伤情况及情况及流式细胞标记法检测ＮＫ细胞对ＨＳＣＴ６的杀伤力。结果：一第部分：随着造模时间增加，大鼠逐渐精神状态及食欲稍变差，皮毛变黄，且局部皮毛有脱落；模型组大鼠肝脏边缘变纯，表面不光滑，局部稍有小结节样改变；肝脏组织病理染色可见汇管区有大量胶原纤维沉积，胶原纤维向汇管

5、区Ｗ。外延伸，部分肝脏有厚薄不等的纤维间隔形成，分割包绕肝小叶肝纤维化指标１成都中医药大学硕±毕业论文＜－（ＨＡ、ＬＮ）检验结果显示模型组较空白组含量增高（尸０．０５）；免疫组化ＳＰ－户＜０法ＳＭＡ．０５）。、平均光密度检测ａ表达含量模型組较空白组明显增高（第二部分：扶正化淚胶囊组及干扰素组的大鼠精神状态、皮毛色泽较模型姐大鼠有改善－化组大鼠肝脏外观无明显差异。肉眼观察扶正化疲胶囊组及干扰素ａ，局部粗糖呈颖粒状，，无明显结节隆起，边缘变鈍而模型组整个肝脏呈粗大小不等结节样变化，肝脏质地较硬，部分大鼠肝脏呈黄褐色样肝纤维化指

6、标结果－显示扶正化疲胶囊组、干扰素ａ化组大鼠外周血中的ＨＡ、ＬＮ含量水平相当，无、Ｌ明湿差异，但上两组大鼠外周血中的ＨＡＮ均较模型组降低且具有统计学差－异（ｆ＜化０５）通过免疫组化ＳＰ法、平巧光密度检测到扶正化疲胶囊组及干扰；－化组大鼠肝组织中ａ－庐：素ａＳＭＡ含量均较模型组含量降低且有统计学意义（０．０５）用同样方法测得扶正化疲胶囊组大鼠肝姐织中的ＮＫ细胞数量与其它组水；平相当无明盈差异。通过流式细胞仪检测外周血中ＮＫ细胞活性，结果显示与干扰素治疗组、模型对照组及正常空白组比较，扶正化疲组的ＣＤ１０７ａ／ＣＤ５６阳性率明显增高

7、（＇＜０．０１），有统计学意义；也通过流式细胞标记法测得与干扰素治疗姐－Ｔ６、模型对照姐及正常空白姐比较，扶正化疲胶囊组ＮＫ细胞对ＨＳＣ杀伤率明思增高（Ｐ＜〇．０１），有湿著统计学差异。结论：一第部分：化学药物ＣＣＬ４腹部皮下法射制备大鼠肝纤维化造模成功。第二部分；中医的益气活血化疲法通过调控ＮＫ细胞活性逆转大鼠肝纤维化。关键词：益气养血化疲法；肝纤维化；ＮＫ细胞。２成都中医药大学硕壬毕业论文ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｅｃｔｉｖｅ：ｊＴｈｉｓｓｔｕｄｙｍａｉｎｌｙｄｉｓｃｕｓｓ化ｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｔｒａ

8、ｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉ