双参饮逆转肝纤维化的实验研究

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1、成都中医药大学硕士学位论文成都中医药大学（临床医学院）二0一八届硕士研究生学位论文双参饮逆转肝纤维化的实验研究ExperimentalStudyonShuangshenYininReversingHepaticFibrosis研究生姓名：周刚指导教师：扈晓宇教授学科专业：中西医结合临床二○一八年五月成都中医药大学硕士学位论文学位论文双参饮逆转肝纤维化的实验研究ExperimentalStudyonShuangshenYininReversingHepaticFibrosis研究生姓名：周刚指导教师姓名：扈晓宇教授/主任医师申请学位级别：硕士学位专业名称：中西医

2、结合临床论文提交时间：2018年04月论文答辩时间：2018年05月二○一八年五月成都中医药大学硕士学位论文中文摘要目的观察双参饮对四氯化碳（CCl4）所诱导的肝纤维化模型大鼠的治疗作用，在此基础上初步探讨双参饮抗肝纤维化的作用，为临床治疗肝纤维化提供实验依据。方法选取健康清洁级SD雄性大鼠65只，体重200±20g。适应性喂养1周后，进行造模实验。将65只实验大鼠随机分为正常对照组（10只），造模组（55只）。造模开始后，除正常对照组外，造模组大鼠均给予腹腔注射40%四氯化碳橄榄油溶液，首次剂量3ml/kg，以后每次剂量为1.5ml/kg，每周2次。造模7周

3、后，随机抽取造模组大鼠3只，以断颈法处死大鼠，沿腹正中线解剖后，分离出肝脏组织,作快速冰冻切片,并观察，结果符合肝纤维化病理改变，提示造模成功。然后随机将造模成功后的大鼠随机分为5组，即模型对照组、秋水仙碱组、双参饮低剂量组、双参饮中剂量组及双参饮高剂量组。从第8周开始停止腹腔注射CCl4，同时给予双参饮各剂量治疗组不同剂量双参饮水煎液3g/kg/d、6g/kg/d、12g/kg/d灌胃，秋水仙碱组给予秋水仙碱0.2mg/kg/d灌胃，模型对照组与正常对照组以等量的生理盐水灌胃，共4周。于实验第11周末次给药后，禁食不禁水24小时，测体重并记录。然后将实验大鼠

4、用1%的戊巴比妥溶液麻醉，对大鼠进行心脏采血，并将之存放于枸橼酸钠抗凝管中，以备实验检测。接着迅速分离出肝脏，处理尽残血后，称重并记录肝脏重量，以备计算肝脏指数。切取各大鼠肝脏组织相同部位约2.0cm×2.0cm×0.3cm大小，存放于10％的甲醛固定液中固定，以备用于肝脏组织学观察。检测大鼠血清生化相关指标：丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）；血清纤维化指标：血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PC-Ⅲ）和Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）等；行HE染色，在光镜下观察肝脏病理

5、学改变，以此评价双参饮对大鼠肝纤维化的保护作用及逆转肝纤维化的药效。1成都中医药大学硕士学位论文结果1、与正常对照组相比较，模型对照组动物肝脏重量和肝脏指数均有明显增加，血清ALT、AST、TBIL及肝纤四项水平均明显升高，ALB水平明显降低，差异均具有统计学意义（P＜0.05），模型对照组肝纤维化程度及炎症浸润情况明显较正常对照组差，差异具有统计学意义（P＜0.05）。2、双参饮可明显改善肝纤维化大鼠的精神状态、饮食情况、皮毛色泽、增加其体重，降低肝脏指数。与模型对照组相比较，双参饮各剂量组大鼠体重明显增加，肝脏指数显著降低（P＜0.05）。3、各组大鼠血清

6、生化检测结果表明：与模型对照组相比，双参饮各剂量组能够显著降低大鼠血清ALT、AST、TBIL水平，提高ALB水平，差异具有统计学意义（P＜0.05）。与秋水仙碱组相比较，双参饮大剂量组降低大鼠血清生化指标更明显，差异具有统计学意义（P＜0.05）。4、各组大鼠血清纤维化指标检测结果显示：与模型对照组相比较，双参饮各剂量治疗组血清HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C含量明显降低，模型组与双参饮各剂量组之间存在显著差异（P＜0.05）。与秋水仙碱组相比，双参饮大剂量组降低大鼠血清HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C指标更为显著，两者差异具有统计学意义（P＜0.05）。5、各组大

7、鼠羟脯氨酸（Hyp）测定结果显示：与模型对照组相比较，秋水仙碱组及双参饮各剂量组肝脏组织Hyp含量均有明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。6、各组大鼠肝组织病理切片观察结果表明：与模型对照组相比较，双参饮各剂量组肝纤维化程度及炎症浸润情况明显好转，双参饮各剂量组与模型对照组之间存在显著差异（P＜0.05）。结论1、中药复方双参饮能够明显改善肝纤维化大鼠的精神状态、饮食情况、皮毛色泽、增加其体重，降低肝脏指数。2、双参饮能够有效改善CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠的肝功，以高剂量较为明显，对CCl4导致的肝纤维化模型大鼠具有明显的抗炎保肝作用。3、双参饮

8、能够显著降低血清纤维化指标的水平，减少