玉米黏虫转录组学研究及rnai机制相关基因的克隆

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1、＾分类号密级ＵＤＣ编号藝／ｈ：ｉＩＮＮＥＲＭＯＮＧＯＬＩＡＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ爾士学位论龛？丨ＭＡＳＴＩＩＲＢＩＳｉｌＲＴＡＴＩＯＭ玉米薪虫转录组学研究及ＲＮＡｉ＿｜机制相关翻的克隆学院：生命科学学院ｆｌ：专业：生物工程，．：；零ｉ＿ｒ。研究方向：农牧业生物工程？：：姓名：授指导教师ｉｌ婆—尊２０１５５２５，年月日学校代码：１０１２６学号：３１３０８１０９分类号：编号：玉米點虫转录组学研究及ＲＮＡｉ机制相关基因的克隆Ｍｙｔｈｉｍｎａ

2、ｓｅｐａｒａｔａｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇａｎｄｃｌｏｎｉｎｇｏｆＲＮＡｉｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅｌａｔｅｄｅｎｅｓｇ学院：生命科学学院专业：生物工程研究方向：农牧业生物工程姓名：其木格指导教师：哈达教授２０１５年５月２５日原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。除本文己经注明引用的内容外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得内蒙古大举及其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己

3、在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：该’指导教师签名：（＞、２日期：ｙ日期：在学期间研宄成果使用承诺书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：内蒙古大学有权将学位论文的全部内容或部分保留并向国家有关机构、部门送交学位论文的复印件和磁盘，允许编入有关数据库进行检索，也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文。为保护学院和导师的知识产权，作者在学期间取得的研究成果属于内蒙古大学。作者今后使用涉及在学期间主要研究内容或研宄成果，须征得内蒙古大学就读期间导师的同意若用于；发表论文，版权单位必须署名

4、为内蒙古大学方可投稿或公开发表。学位论文作者签名－指导教师签名：、毛日期：日期：目录？＾ＩＡｂｓｔｒａｃｔＩｌｌ一第章文献综述１１１玉１．米點虫１……．２ＲＮＡ干扰机制１１２．Ａｉ１．１ＲＮ的发现简史２１．２ｉ２．ＲＮＡ的作用机制３１．２．３ＲＮＡｉ在植物抗虫基因工程的应用３１．３转录组学研宄概述１．４．３１转录组测序方法１４．３．２昆虫转录组研究概况１４５．研宄意义第二章基本材料与方法６２１６．昆虫词养相关材料和设备２１１６．．玉米點虫饲养

5、２．１工气候箱６．２人２．１３植物培养室６．６２．１．４养虫盒１７２．．５取虫工具２７．２常用试剂的配制２１．２．琼脂糖凝胶电泳相关试剂７２２８．２．感受态细胞的制备９２．３ＬＢ．２培养基的制备ＯＣ２．４Ｓ９．２培养基的配制２．５１０．２杂交试验相关试剂配制第三章玉米點虫转录组测序及功能注释１１１１１３．转录组测序及序列拼接录组序列特征１３．２转１３２．１２．产量统计１１３．２组２．２装结果分析ｉ３．３Ｕｎｅｎｅ１４．２ｇ功能注释２９３．３職３．

6、４帷３０第四章玉米點虫ＲＮＡｉ机制相关基因的克隆３１４．１引物设计３２４．２基因克隆３３４２．１ＲＭ３４．总提取一４．２．２ｃＤＮＡ第链合成３５４．２．３ＰＧＲ技术体外扩增ＤＮＡ３６４．２．４ＰＣＲ产物回收３８－组Ｔ４．３９．２５重载体的构建４２．Ｔ１感受态细胞转化３９．６４ＤＮＡ．２．７质粒提取４０４．２．８重组质粒的ＰＣＲ鉴定４０４．２．９重组质粒的酶切鉴定４２４ｉ４．２．１０Ｕｎｉｇｅｎｅｓ序歹ｊ测定３４３ＲＡＣＥ４４，克隆实验４．

7、３１４４．引物设计４４４．３．２ｍＲＮＡ纯化实验４．４６．３３ＲＡＣＥｃＤＮＡ合成４．４７．３４ＲＡＣＥＰＣＲ检测４３ＥＰＣＲ４９．．５ＲＡＣ产物重组质粒的鉴定４５０．３．６ＲＡＣＥ产物重组质粒的酶切鉴定１４５．３．７序列测定４５２．３．８结果分析４５２．４序列组合拼接５２４．４１．引物组合４５５．４．２琼脂糖凝胶电泳结果４５５．４．３组合引物ＰＣＲ扩增片段克隆４５７．４．