玉米转录因子zmwrky19基因的克隆及功能研究

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1、分类号：0945学校代码：10712UDC：577研究生学号:2012051019密级：公开灶农林哿长大学2015届攻读硕士学位研究生学位(毕业）论文玉米转录因子基因的克隆及功能研究学科专业生物化学与分子生物学研究方向植物抗逆分子生物学研究生严俊指导教师赵天永教授完成时间2015年5月中国陕西杨凌研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的硕士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知

2、，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：飞W时间：X年导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的硕士研究生j所呈交的硕士学位(毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学

3、术道德的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。导师签名：爷时间：年扑日...关于研究生学位（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，愿意

4、按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并承担法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人(包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名:时间：年“月日导师签名:时间:月日Classificationcode:Q945Universitycode:10712UDC:577Postgraduatenumber:201205

5、1019Confidentialitylevel:OpenThesisforMasterDegreeNorthwestA&FUniversityin2015ISOLATIONANDCHARACTERIZATIONOFMAIZETRANSCRIPTIONFACTORZMWRKY19GENEMajor:BiochemistryandMolecularBiologyResearchfield:MolecularBiologyofPlantResistanceNameofPostgraduate:YanJunAdviser:Prof.Zhao,TianyongDateofsub

6、mission:May,2015YanglingShaanxiChina玉米转录因子ZmWRKY19基因的克隆及功能研究摘要玉米(ZeamaysL.)是我国第一大农作物，然而干旱、盐渍、冷害、病虫害等逆境环境严重影响玉米的产量和质量。利用现代分子生物学技术发掘抗病虫害等抗逆基因并将之应用于玉米育种，可以提高农作物抗性。WRKY转录因子不仅参与植物生长发育和生长代谢表达调控，还广泛涉及植物对逆境胁迫的应答反应。本研究通过同源克隆的方法从玉米B73中克隆ZmWRKY19基因，在拟南芥中超表达并对其抗逆功能进行初步分析，研究结果如下：1.采用PCR方法克隆了ZmWRKY19基

7、因。该基因在玉米数据库中GeneID为GRMZM2G382350，基因全长5212bp，编码区为723bp，共编码240个氨基酸。氨基酸序列中包括一个典型的WRKY保守结构域，锌指结构为C2HC型。该基因编码蛋白分子量为26.8KD，等电点为6.25。2.通过实时定量RT-PCR技术检测该基因对各种逆境胁迫的应答，结果表明该基因对水杨酸、盐胁迫、42℃热激等处理有响应。3.构建了亚细胞定位载体。分别转化洋葱表皮细胞和烟草细胞，亚细胞定位结果表明该基因表达产物定位于细胞核中；构建荧光双报告载体，在玉米愈伤原生质体中验证目的基因的转录活性，瞬