油桐ssr分子标记的开发与遗传多样性的研究

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1、；密级：分类号学校代号；１０５３８学号：２２０１２００１６４？ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＦｏｒｅｓｔｒ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｙｇｙ硕±学术学位论文油桐ＳＳＲ分子标记的开发与遗传《样性的研究作者姓名：贾宝光导师姓冶：张淋培养学院：林学院学科若称；经济林研究方向：经济林栽培与育种？提交日期：２０１５年６月ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＭｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉ化ＭａｒｋｅｒｓａｎｄＩｎｖｅｓｔ

2、ｉａｔｉｏｎｏｆｇＧｅｎｅｔｉｃＤｉｖｅｒｓｉｔｉｎＴｕｎＴｒｅｅ（Ｖｅｒｎｉｃｉａｏｒｄｉｉ）ｙｇｆｂｙＪＴＡＢａｏｇｕａｎｇＡｔｈｅｓｉｓｓｕｂｍｉｔｔｅｄｉｎａｒｔｉａｌｓａｔｉｓｆａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐＲｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒｔｈｅｄｅｒｅｅｏｆｑｇＭａｓｔｅｒｏｆＡｒｏｎｏｍｇｙＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒＰｒｏｆｅｓｓｏｒＺＨＡＮＧＬｉｎＣｅｎｔｒａｌＳｏｕ化Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ？〇化８巧ａｎｄＴｅｃ

3、ｈｎｏｌｏｇｙ４９８ＳｈａｏｓｈａｎＳｏｕｔｈＲｏａｄ，ｌｌａｎｘｉｎＤｉｓｔｒｉｃｔＣｈａｎｇｓｈａＨｕｎａｎ４１０００４，Ｐ．Ｒ．ＣＨＩＮＡＪｕｎｅ，２０１５中斋妹來种技夫ｆ学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研巧成果。除了文中特别加Ｗ标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品，也不包含为获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要

4、贡献的个人和集体，均己在文中明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：廣錄州各年ｒ月日中斋棘巫种投乂營学位论文版权使用授枚书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件或电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可从采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。龙学仿属千．１、保密□，在＿＿年解密后适

5、用本授权书。＿＂２、不保密０。＂＂（请您在Ｗ上相应方框打Ｖ）作者签名【：裹鉤导师签名：年古月父日苗年ｒ月令曰（摘要’油桐（Ｆ如ｗｃ切於Ｗ巧属于大戟科油桐属，是世界著名的重要木本油料植物，更在生物能源方面拥有巨大的开发价值，所Ｗ将油桐作为木本油料树种开展长期的育种技术研究。由于油桐种质资源的数量、性状表现、遗传多样性等研究的深度很大程度上制约着育种的成效，且油桐是我国恃有的经济林木，具有极其丰富的种质资源，但是油桐中开发出来的分子标记较少，远不能满足分子育种研究

6、的需要。因此，本研究将开发高效的分子标记为油桐遗传多样性的研究、提供重要的技术手段，同时为油桐的分子标记辅助育种、遗传连锁图谱构建群体遗传学研究、品种纯度鉴定、系谱分析等提供理想的分子标记，有利于促进油桐资源的品种选育与种质开发、利用。主要研究结果如下：一１、从油桐种子ＥＳＴ文库中获得非冗余单ＥＳＴ序列１０４７条，用ＭＩＳＡ软－卫星件从１７３个非冗余ＥＳＴ序列中搜索得到２１２个ＳＳＲ位点。在２６ｂｐ的微中，主要是二核昔酸重复类型为主导（６８．４％），其次是Ｈ核巧酸重复类型（２５

7、．９４％）。其优势基元为ＡＧ／ＣＴ（４３．８７％）、ＡＴ／ＡＴ１９．３４％）和ＡＧＣ／ＧＣＴ（５－．６６％。ｒｉｍｅｒ５（利用软件Ｐ．０，设计６８对ＥＳＴＳＳＲ引物，选择了１０个不同品）系的油桐样本进行ＰＣＲ扩增，产物经过琼脂糖电泳和毛细管电泳检测，最终获４对多态－ＳＳＲ得了１性的ＥＳＴ标记。２、运用ＭＩＳＡ软件对油桐种子转录组的８１８０５条Ｕｎｉｅｎｅｓ进行ＳＳ民位点ｇ的搜索，在５４０４个ＩＭｅｎｅｓ中搜索得到６３６６个ＳＳＲ位点，并统计分析其ｇｅｎｃ－－二Ｈ核昔酸重复类

8、ＧｉＳＳＲ的组成与分布特点。在２６ｂｐ的微卫星中，核和型占主导地位９２％，其优势基元为ＡＧ／ＣＴＧ１．３４％）、ＡＡＧ／ＣＴＴ（１３．３１％，共占）ＡＴ－和／ＡＴ（１１．９９％）。用软件Ｐｒｉｍｅｒ５．０，设计９８对ＧｅｎｉｃＳＳＲ引物，从１６９份油桐种质资源样本中选取具有代表不同地理来源的４１个样本进行ＰＣＲ扩増，５ｅｎ－产物经过琼脂糖电泳和毛细管电泳检测，最终筛选出１对多态性