柴胡疏肝散联合bmscs移植对ami鼠心肌保护作用及对pi3kakt信号通路的影响研究

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1、分类号：学校代码：密级：学号：湖南中医药大学博士学位论文柴胡疏肝散联合移植对鼠心肌保护作用及对信号通路的影响研究学科专业：中医内科学研究方向：心血管疾病的中医药防治作者姓名：吴若霞导师姓名、职称：黄政德教授学位类型：科学学位中国湖南长沙二零一五年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师的指导下进行的研宄工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他已经发表或撰写过的研宄成果，也不包括为获得湖南中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明。作者签名：加

2、年月对日关于学位论文使用授权说明本人完全了解湖南中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅或借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他手段保存学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门的规定送交学位论文。缩略语表缩写词英文全文中文名称急性心肌梗死骨髓间充质干细胞小牛血清白蛋白碱性成纤维细胞生长心电图最低必需培养基乙二胺四乙酸酶联免疫吸附测定异硫氢酸荧光素苏木素伊红缺血再灌注损伤柴胡疏肝散左前降文激光扫描共聚焦显微镜徵血管密度氯化硝基四氮唑蓝磷酸盐缓冲液血小板源性生长因子核糖核酸缓冲盐水血管内皮生

3、长因子超氧化物歧化酶丙二醛缝隙连接蛋白二磷酸碟脂酰肌醇三磷酸碟脂酰肌醇糖原合成酶激酶核转录因子丝裂原活化蛋白激酶低氧诱导因子脂酰肌醇激酶蛋白激酶中文摘要探讨柴胡疏肝散联合骨髓间充质干细胞（移植对急性心肌梗死大鼠心肌的保护作用，并进一步研究其对心肌细胞信号通路的影响探讨其保护机制。方法：理论研宄：结合历代医家对“胸痹”、心痛”和“真心痛”关于病因、病机、治法等的论述，以及骨髓间充质干细胞治疗的最新进展，探讨柴胡疏肝散联合骨髓间充质干细胞移植保护心肌的理论基础。实验研究：实验一：采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法提取、培养骨髓间充质干细胞。大鼠随机分为组：组：假手

4、术组、组：模型组、组：组、组：组（柴胡疏肝散小剂量移植组）、组：组（柴胡疏肝散中剂量移植组）、组：组（柴胡疏肝大剂量移植组）。各组大鼠于移植后灌胃末次灌胃后处死。取血清用生化法检测心肌酶、和含量，法检测表达；取心肌梗死边缘区心肌组织，染色观察心肌形态学变化，免疫组化法检测血管内皮生长因子。实验二：采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法提取、培养骨髓间充质干细胞。大鼠随机分为组：组：假手术组、组：模型组、组：组、组：组（柴胡疏肝散移植组）、组：组（抑制剂）移植）、组：组（移植柴胡疏肝散）。分别于移植后灌胃，末次灌胃后处死。取心肌梗死边缘区心肌组织，法检测心肌凋亡，免

5、疫组化法检测、及表达，法检测总、总、及表达，检测与表达。结果：理论研究：现代文献认为不良情绪就是急性心肌梗死的独立危险因素。中医整体观早就认识到不良情绪对疾病发生发展的影响，柴胡疏肝散作为疏肝解郁之良方，可作为“从肝治心”基础方；治疗有较好临床应用前景，中药提取物以及复方在干细胞的动员、迁移、增殖和分化中发挥着作用，可进一步提高治疗的疗效。实验研宄实验一：光镜下观察细胞形态较为一致，多纺锤形、多角形排列，呈“漩涡”样生长，应用流式细胞仪检查细胞均一性较好，纯度较高，符合实验要求。染色显示：与模型组相比，、、、组均可减轻后大鼠心肌细胞坏死程度，减少心肌间质出血和

6、炎症细胞浸润，毛细血管数目增多。与模型组相比，、、、组均可降低大鼠血清心肌酶、含量，差异有统计学意义（增加活力并降低含量，差异有统计学意义（尸增加血清中的含量，差异有统计学意义（增加心肌细胞蛋白表达，差异有统计学意义（尸且组作用最明显。因此，高剂量柴胡疏肝散生药联合移植对心肌梗死大鼠心肌组织保护作用更佳。实验二：与模型组相比，、组均可增加表达，提高磷酸化水平，差异有统计学意义（并引起下游表达减少，提高磷酸化水平，抑制活性，差异有统计学意义（增加表达并减少、表达，差异有统计学意义（降低心肌细胞凋亡指数，抑制心肌细胞凋亡，差异有统计学意义（户且组作用更加明显。当应

7、用抑制剂后，、组表达减少，磷酸化水平降低，与组比较差异有统计学意义（表达增多，磷酸化水平降低，活性增加，与组比较差异有统计学意义（尸表达降低，、表达增加，心肌洞亡指数升高，抑制心肌细胞凋亡的作用减弱，与组比较差异有统计学意义（。结论：柴胡疏肝散联合移植可改善大鼠心肌组织病理学形态，减少心肌酶、漏出，提高活性并抑制合成以抑制氧自由基代谢水平，增加血清含量并促进心肌细胞合成蛋白，且以柴胡疏肝散浓度为生药灌胃时作用更佳。柴胡疏肝散（浓度生药灌胃）联合移植可抑制大鼠心肌细胞凋亡，其机制可能与激活信号途径及信号途径相关。关键词：急性心肌梗死柴胡疏肝散信号通路细胞凋亡英文

8、摘要centrifugationmet