巴西橡胶树hbserk1基因启动子的克隆及其功能分析

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1、s/0大營硕士学位论文题目：巴西橡胶树基因启动子的克隆及其功能分析作者：指导教师：陈雄庭研究员专业：林木遗传育种时间：二〇一五年五月CloningandFunctionalAnalysisoftheGenePromoterofHbSERKlinHeveabrasiliensisAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinAgronomyByJiaRuiSupervisor:cJm^>乂丨，，海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文

2、，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：曰期：丨■年‘月》曰学位论文版权使用授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以为存在馆际合作关系兄弟髙校用户提供文献传递服务和交换服务《本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索可以采

3、用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名：导师签名：曰期：丨年月曰曰期如年《月；曰本人已经认真阅读“高校学位论文全文数据库发布章程同意将本人的学位论文提交高校学位论文全文数据库”中全文，布，并可按“章程”中规定享受相关权益。同意论文提交后滞后：口半年：—年：年发布。论文作者签名：丨导师签名：日期：年月日日期：如『年月日摘要是一个能使植物细胞获得胚性能力的蛋白质，属于超级家族。第一个基因是在胡萝卜下胚轴胚性细胞培养物中分离到的表达分析结果表明，可将基因作为有胚发生能力的分子标记。大量的研宄证明橡胶树体细胞胚的获得是橡胶树

4、组织培养过程中的关键。本研究以橡胶树胚胎发生相关类受体蛋白激酶基因为切入点，分离得到的启动子，并对其功能进行了初步的研宄，为在橡胶树体细胞胚胎发生中的表达调控机制打下理论基础。本研究从巴西橡胶树中克隆了一个况启动子，与橡胶树全基因组序列及序列比对，结果表明启动子是位于翻译起始位点上游的序列，且该片段序列含量高达满足真核生物启动子序列的特征。该启动子序列中含有等多个较典型的真核生物启动子基本元件，如：等。同时存在其它应答元件，如：、、、、、、等。为了验证孙五启动子的功能，克隆了个’端缺失启动子，并构建了个缺失植物表达载体。利用农杆菌真空渗透法将各植物缺失表达载体转化三生

5、烟草叶片，对暗培养两天的叶片进行活性原位分析和活性定量分析检测，结果表明：除了外，其它缺失表达载体均可以驱动蛋白的表达，说明在启动子区域可以驱动的表达，表明启动子具有活性。利用农杆菌介导法将植物缺失表达载体转化烟草，经过潮霉素筛选和检测，初步获得含启动子缺失表达载体的转基因烟草，并对转基因烟草进行活性原位分析和活性定量分析，结果表明除了外，其它缺失表达载体均可以驱动蛋白的表达，说明在启动子区域可以驱动的表达，表明启动子具有活性。稳定表达的结果与瞬时表达的结果在检测上一致，证明启动子是具有生物活性的启动子。关键词：巴西橡胶树；启动子功能分析AbstractSERKisa

6、proteintomakeaplantcellobtainedembryonicabilitywhichbelongstotheLRR-RLKsuperfamily.SERKgenewasfirstisolatedinhypocotylsembryoniccellcultureofcarrot,andstudieshavedemonstratedthatSERKgeneisamolecularmarkerwhichhasembryonicability.Itwasshownthatthekeytothetissuecultureoftherubbertreeistoo

7、btainthesomaticembryogenesis.BasedonHbSERKlgene，，，，，，’，，expressionandtransientexpressionhavetheconsistencyinGUSactivitytest，；；目录弓言巴西橡胶树的研宄现状基因家族的研宄进展基因家族：狀基因的结构基因的表达及调控：基因的蛋白功能植物启动子的概述植物启动子的基本结构植物启动子的分类启动子功能研宄方法启动子的克隆本研宄的目的和意义本研宄的技术路线材料与方法材料与设备植物材料实验试剂实验仪器实验方法巴西橡胶树观■启动子的克隆构建巴西橡