巴西橡胶树hbcdpk基因和hbfro基因的克隆及其在抗病中的初步功能分析

《巴西橡胶树hbcdpk基因和hbfro基因的克隆及其在抗病中的初步功能分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、洛大營硕士学位论文题目：巴西橡胶树基因和基因的克降及其在抗病中的初步功能分析作者：方佳俊指导教师：罗红丽研究员类另学术型专业：遗传学时间：二—五年五月CloingandcharacterizationofCalciumdependentproteinkinasegeneandFerrirchelatereductasegeneindiseaseresistanceofHeveabrasiliensisAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDe

2、greeinAgronomyByFangJia-junSupervisor:LuoHong-liM^Major:geneticsSubmittedtime:May,2015海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郄重声明：、所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出璽要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明本声明的法律结果由本人承担。论文怍者签名：日期：年月学位论文钣权使用授权说明本

3、人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被査阅和借阅《学校可以为存在馆际合作关系兄弟高校用户提供文献传递服务和交换服务。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文》保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名：‘导师签名：日期：年月日期年：月泌日本人已经认真阅读“高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交“高校学位论文全文数据库”中全文，布，并可按“聿

4、程”中规定享受相关权益》同意论文提交后滞后：□半年；一年：年发布。论文作者签名：导师签名：曰期：年月访曰曰期：年女月曰摘要天然橡胶是工业原料不可缺少的一部分，同时也是国防和经济建设不可缺少的战略物质和稀缺资源。巴西橡胶是获得天然橡胶的重要经济树种，橡胶树病害是影响天然橡胶产量的重要因素之一。前期研宄中，为了研究橡胶树抗病机理，进一步发现挖掘橡胶树抗病相关的关键基因，我们对受炭疽病菌侵染的橡胶树叶片进行了转录组分析，结合己有的橡胶树基因组序列信息，对其中两个炭疽病菌侵染前后表达变化较大的基因和进行了全长克隆和相关研宄，结果如下：钙依

5、赖蛋白激酶（是信号传导途径中的关键酶，在植物抗病反应中发挥作用。本研宄对克隆得到的橡胶树钙依赖蛋白激酶同源基因：的序列进行测定和分析，结果表明该基因编码一个个氨基酸的蛋白，分子量为，等电点为，为一弱酸性蛋白，含有家族特有的—蛋白激酶结构域以及钙离子结合域。半定量表达分析结果表明，胶胞炭疽病菌接种橡胶树叶片能够明显增强欠基因的表达，而白粉病菌的侵染没有明显改变橡胶树叶片基因的表达，暗示基因可能与橡胶树抗炭疽病有关，而与抗白粉病关系不大；抗病信号分子水杨酸（、茉莉酸（能够在早期诱导招尤基因的表达，但乙烯（对基因的表达没有影响，表明与和

6、介导的信号转导途径有关，与乙烯信号途径关系不大；细菌鞭毛蛋白可以快速诱导足基因的表达，但作为真菌分子的则不能诱导基因的表达，说明欠基因与激活的橡胶树反应有关。尤基因的表达能够引起橡胶树细胞内活性氧的积累。己有的研究表明，活性氧是植物抗病反应的早期信号之一，因此推测尤基因能够通过促进细胞内活性氧的积累来激活橡胶树的防卫反应。亚细胞定位研宄发现，蛋白定位于细胞膜上。此外，已将基因转入拟南芥中，并获得了代种子，目前正在进行转基因植株的抗病性分析。三价铁螯合还原酶（家族是双子叶植物和非未本科单子叶植物应答铁胁迫的关键酶之一，参与了植物与病

7、原微生物的相互作用。本研宄获得了橡胶树三价铁螯合还原酶的同源基因，包含一个长度为的完整幵放阅读框，编码一个长个氨基酸的多肽，包含个保守结构域，分别为三价铁还原结合域（结构域），氧化还原辅酶结合位点（结构域）和辅酶结合域（结构域），和一个含个跨膜结构域的跨膜区。半定量表达分析结果表明，橡胶树炭疸病菌和白粉病菌的侵染能够明显降低橡胶树叶片中基因的表达，暗示基因可能与橡胶树对这两种病害的抗性有关，起负调控作用；抗病信号分子水杨酸（、乙烯（能够诱导顶基因的表达，但茉莉酸（对基因的表达没有明显的影响，表明与和介导的信号转导途径有关，与信号途

8、径关系不大；细菌鞭毛蛋白和真菌分子的可以快速诱导基因的表达，说明基因参与了橡胶树的反应。的产生是典型的反应之一，但基因的表达并不能够引起橡胶树细胞内活性氧的积累，表明必厂及参与的反应与没有明显联系。亚细胞定位研宄发现，蛋白定位于细胞膜上。此外，己将