苹果pgip基因部分家族成员启动子的克隆与功能分析

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1、园艺学报2014，（4111）：2169–2178http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com苹果PGIP基因部分家族成员启动子的克隆与功能分析*符聪慧，王建平，张冲，马锋旺，张军科（西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100）摘要：根据已发表的苹果基因组序列设计特异引物，克隆了苹果（Malus×domesticaBorkh.）品种‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’中PGIP家族基因PGIP1和PGIP2的启动子片段，序列分析结果表明PGIP1与PGIP2启动子序列相

2、似度为71%，‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’的PGIP1、PGIP2启动子相似度都达到了99%。两个品种PGIP1启动子中TATA-box和CAAT-box的数量明显多于PGIP2，PGIP1和PGIP2启动子分别存在茉莉酸甲酯和水杨酸响应元件，暗示PGIP1和PGIP2存在不同的抗病响应途径。构建了启动子︰︰GUS融合表达载体，通过对农杆菌介导法转化烟草叶片中的GUS活性分析，比较了不同启动子的活性。结果表明：PGIP1启动子活性在品种间差异不显著；PGIP2启动子活性在品种间差异显著，‘秦冠’是‘太平洋玫瑰’的2.37倍，可能与品种抗病性差异有关；同一品种中

3、PGIP1启动子活性显著高于PGIP2。关键词：苹果；PGIP基因；启动子；顺式作用元件中图分类号：S661.1文献标志码：A文章编号：0513-353X（2014）11-2169-10CloningandFunctionAnalysisofPartofPGIPGeneFamilyMemberPromotersfromApple*FUCong-hui，WANGJian-ping，ZHANGChong，MAFeng-wang，andZHANGJun-ke（CollegeofHorticulture，NorthwestA&FUniversity，Yanglin

4、g，Shaanxi712100，China）Abstract：PrimersweredesignedaccordingtothepublishedsequenceoftheapplegenomeandtwoPGIPgenepromotersofMalus×domesticaBorkh.‘Qinguan’and‘PacificRose’werecloned.PGIP1were71%homologywithPGIP2genepromotersinbothapplecultivar；BothPGIP1andPGIP2genepromotersof‘Qinguan

5、’and‘PacificRose’sharedasequenceidentityof99%.PGIP1promotershadmoreTATA-boxandCAAT-boxthanthatofPGIP2promoters，andPGIP1genepromoterscontainedmethyljasmonate-responsiveelements，whilePGIP2genepromotersowedsalicylicacidresponsiveelements.It’sspeculatedthattherearedifferentdiseaseresp

6、onsepathwaysofPGIP1andPGIP2.PGIPpromoteractivitywereevaluatedbypromoter︰︰GUSfusionexpressionintransgenictobaccoleavesandtheresultsshowedthatthePGIP1promotersactivitywasnotsignificantbetweencultivarswhilePGIP2promoterof‘Qinguan’washigherthanthatof‘PacificRose’，andtheformer’sactivit

7、ywas2.37foldsofthelatter，whichwasprobablyrelatedtotheresistancedifference.Inthesameapplecultivar，PGIP1genepromoters’收稿日期：2014–06–27；修回日期：2014–09–12基金项目：国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目（CARS-28）*通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：zhangjk@nwsuaf.edu.cn）2170园艺学报41卷activitiesweresignificantlyhigh

8、erthanthatofPGIP2.Keywords：apple；