丙泊酚与盐酸法舒地尔联合应用对脑发育期大鼠海马神经元的影响

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1、授予单位代码10089学号或申请号20122188HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位丙泊酚与盐酸法舒地尔联合应用对脑发育期大鼠海马神经元的影响作者姓名：杨姣姣导师：刘雅教授专业：麻醉学二级学院：河北医科大学第二医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权

2、均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名导师签章:二级学院领导盖章：‘^'}Sit；年+月！日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：导_章:年七月1曰目录中文摘要………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………3研究论文丙泊酚与盐酸法舒地尔联合应用对脑发育期大鼠海马神经元影响前言…………………………………

3、…………………………7材料与方法……………………………………………………7结果……………………………………………………………15附图……………………………………………………………17附表……………………………………………………………20讨论……………………………………………………………22结论……………………………………………………………24参考文献………………………………………………………24综述全麻药物对发育期大脑的毒性机制及研究现状……………………27致谢………………………………………………………………………39个人简历…………………………………………………………

4、…40中文摘要丙泊酚与盐酸法舒地尔联合应用对脑发育期大鼠海马神经元的影响摘要目的：探讨反复腹腔注射丙泊酚对脑发育期SD大鼠海马神经元的毒性作用及远期学习记忆功能的影响；盐酸法舒地尔是否能减轻丙泊酚诱导的海马神经元的凋亡。方法：1实验动物及模型制备健康七日龄SD大鼠65只，雌雄各半，12-19g，按照随机数字表法分为五组（n=13）：空白对照组（B组），溶剂对照组（S组），丙泊酚组（P组），丙泊酚+法舒地尔组（PF组）和法舒地尔组（F组）。B组不做任何处理；S组腹腔注射脂肪乳7.5ml/(kg·d)，连续7天；P组腹腔注射丙泊酚75ml/(kg·d)，连续7天;PF组腹腔

5、注射法舒地尔10ml/(kg·d)+丙泊酚75ml/(kg·d)，连续7天；F组腹腔注射法舒地尔10ml/(kg·d),连续7天。除空白组外所有组注药容量均用脂肪乳定容至10ml/kg。麻醉后待翻正反射消失，将幼鼠放入持续低流量供氧（2L/min）的暖箱中，翻正反射恢复后放回母鼠身边（与母鼠分离时间不超过5h）。2标本采集及检测方法2.1末次注药后15min各组随机抽取5只检测血糖及血氧。2.2Westernblot法检测海马组织相关蛋白的表达情况末次腹腔注射24h后各组随机选取3只SD幼鼠1%戊巴比妥钠（0.003ml/g）麻醉，断头取脑，冰上分离海马组织。然后将海马

6、剪碎放入加有裂解液和蛋白磷酸酶抑制剂的混合液中，电动匀浆器匀浆，离心机中4℃10000r/min离心5min,取上清，用Western-blot法检测海马组织中Bcl-2的表达情况。2.3caspase3活性检测试剂盒检测海马组织caspase3的活性表达。末次注药后24h随机另取5只SD幼鼠，1%戊巴比妥钠（0.003ml/g）麻醉后断头取脑，冰上分离取出海马，匀浆提蛋白后加入试剂盒中反应底物，与组织中caspase3酶孵育反应，通过测定黄色产物的吸光度值检测组1中文摘要织中caspase3的活性表达。2.4Morris水迷宫测试各组SD大鼠远期空间学习记忆能力各组随

7、机选取的5只SD大鼠饲养至60天时进行Morris水迷宫测试。大鼠训练5天，每天2次，从下水开始到找到平台的时间记录为逃逸潜伏期。第6天，大鼠面壁轻放入撤去平台的水迷宫中游120s，记录穿越平台的次数。结果：1五组大鼠血氧饱和度及血糖值均在正常范围内，组间无明显差异（P＞0.05）。2Westernblot结果显示：各组与B组相比Bcl-2的表达均减少，有显著差异（P＜0.05）。P组与S组、PF组相比，Bcl-2的表达显著降低（P＜0.05）。PF组与F组相比Bcl-2表达量降低（P＜0.05）。3各组caspase3活性蛋白表达量均高