不同日龄鸡卵巢中ifn-γ、il-2、il-4和il-10 mrna表达水平变化规律的研究

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1、分类号：S852.16单位代码：10193密级：公开学号：2012607硕士学位论文不同日龄鸡卵巢中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10mRNA表达水平变化规律的研究StudyontheExpressionofIFN-γ,IL-2,IL-4andIL-10mRNAinOvaryofHensatdifferentAge作者姓名：刘莹学位类别：农学硕士专业名称：基础兽医学研究方向：动物解剖与组织胚胎学指导教师：栾维民教授所在学院：动物科学技术学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，

2、除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文

3、的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日摘要由于禽类没有淋巴结，所以家禽主要的外周免疫器官是黏膜相关淋巴组织（mucosa-associatedlymphoidtissue，

4、MALT）。泌尿生殖道相关淋巴组织是其重要组成部分，另外也包括消化道和呼吸道相关淋巴组织。对于蛋鸡，泌尿生殖道相关淋巴组织的免疫功能的建立直接影响着机体的生理、生殖机能和健康状况。卵巢是卵泡生长和成熟的场所，卵巢卵泡的生长发育与产蛋性能和蛋的品质密切相关，而由于鸡的生殖道与外界联通，卵巢易受到病原菌的感染进而通过其所产蛋纵向传播给后代。本研究采用SYBRGreenI实时荧光定量PCR方法对7、14、21、35、56、90、140、210、280和350日龄蛋鸡卵巢中的Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2以及Th2类细胞因子IL-4、IL-10的mRNA相对

5、表达量进行了检测，从而探讨蛋鸡卵巢免疫功能的发育的过程和规律。结果显示：1.整体上各基因的表达水平在7~90日龄时呈增加趋势，而在140日龄至350日龄则基本处于较低的水平。除IL-4基因在140日龄时达到其表达的峰值外，其它三个细胞因子均在90日龄达到最高值，四种基因mRNA相对表达水平在280与350日龄时较产蛋初期有所回升。2.IFN-γ比IL-2的表达量高出数倍，但二者的变化趋势几乎一致。3.IL-4和IL-10的表达量并未像IFN-γ和IL-2在140日龄时显著降低，且在140~350日龄时IL-4和IL-10的表达水平超过了IFN-γ和IL-2

6、。4.IFN-γ和IL-4从生长发育期直至产蛋前期90日龄的表达量都显著高于其它两个细胞因子，且二者的变化维持一定的比例。5.IL-2和IL-10基因始终处于相对较低的表达水平，在蛋鸡生长发育阶段，二者在卵巢中的相对表达量相差无几，而在90日龄时，IL-10的mRNA表达量显著高于IL-2，此后，在母鸡的产蛋阶段，IL-10的表达水平也一直高于IL-2。结果表明，蛋鸡卵巢的免疫发育与日龄变化密切相关，表现出明显的日龄依赖性。在生长发育阶段，细胞因子的表达水平随日龄的增加而上升，56日龄时已达到较高的免疫水平，并在产蛋前期达到最高水平，而鸡达到性成熟开始产蛋

7、时免疫机能骤然下降，在产蛋期又有所回升。在基因表达方面，IL-4和IFN-γ的关系为相互制衡，IL-2和IL-10的表达也呈相互抑制。此外，在此研究中虽然总体表达水平在母鸡性成熟之后较性成熟之前有所降低，但在性成熟之后Th2型细胞因子的表达水平却超过了Th1型，表明在性成熟之后，卵巢中发生的免疫应答平衡更偏向于以体液免疫应答为主的Th2类免疫应答反应。I本研究为蛋鸡生殖系统疾病的防治、最佳免疫时间的选择提供了一定的理论依据，并最终为人们能够食用上健康无污染的鸡蛋奠定基础。关键词：卵巢，细胞因子，mRNA，表达水平，荧光定量PCRIIAbstractSinc

8、ethereisnolymphnotesinchicken,，mu