三七对下肢缺血大鼠模型血管新生作用的研究

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1、'学校代码:87401学号;8740112012山西省中医药巧突悦名页db学位论文H尤对下肢缺血大鼠模型血管新生作用的研究学位申请人王雁彬导巧姓名李廷垄专业名称中医内科学研究方向周函血管病申请学位类型专业学位论文提交日期201目年5月...-.*山西省中医药研巧院学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,

2、均已在文中明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名_iJLM日期:年月日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山西省中医药研究院有关保留使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人授权山西省中医药研究院可W将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名iMM论文导师签名_日期:年月中文摘要目的:通过检测三七对下肢缺血大鼠模型血管内皮

3、生长因子(VEGF)、毛细血管密度++(MVD)、CD34、FLK-1以及血酶等的影响,探讨三七对大鼠缺血下肢血管新生的影响,为下肢缺血性疾病的临床治疗寻找有效方法。方法:180只SPF级SD大鼠随机分组为:正常组、模型组、三七高剂量组、三七中剂量组、三七低剂量组、丹参片组;模型组、三七组和丹参片组大鼠行左侧下肢股动脉结扎术,造成下肢血管缺血模型。三七高、中、低剂量组分别按照0.572g∕kg、0.286g∕kg、0.143g∕kg术后进行灌胃;丹参片组按照0.286g∕kg灌服,每天1次,连续14天。正常组和模型组灌服蒸馏水。分别于术后3天、7天、14天对各组大鼠中外周血肌酸激

4、酶(CK)、乳酸脱氢酶++(LDH)、谷草转氨酶(AST)、CD34、FLK-1进行测定;取术侧腓肠肌,观察缺血下肢毛细血管结构的恢复,计算毛细血管密度(单位视野蓝染面积/单位视野面积);左下肢苏木精-伊红(HE)病理染色,观察骨骼肌细胞间血管数目;测定肌肉组织中VEGF蛋白表达;术后第14天观察各组左下肢坏死例数。结果:1.术后3天,SD大鼠缺血后肢未见出血、坏疽,颜色发白,伤口结痂;术后7天,伤口渐趋愈合;术后14天,血痂脱落,模型组见2例缺血后肢足垫处发黑。2.血酶测定:术后3天,除正常组外余组各组CK、LDH、AST均升高,三七低剂量组和模型组CK、AST值显著高于丹参片

5、组及三七中、高剂量组(P<0.01);术后7天,各组LDH、AST、CK值普遍降低,其中丹参片组、三七各剂量组较模型组下降显著(P<0.05),三七高剂量组下降最为显著(P<0.01);术后14天,各组AST、CK、LDH值较前呈缓慢下降趋势,与术后7天差异不明显,与术后3天差异显著(P<0.05)。++3.CD34、FLK-1阳性细胞测定:术后3天,丹参片组和三七各剂量组的值对比模型组都有所增高,其中三七高剂量组升高最显著(P<0.01);术后7天,三七高剂量组比例较其他组显著升高(P<0.05);术后14天,各组表达均有所降低。4.VEGF表达测定:术后3天,三七高、中剂量、

6、丹参片组较模型组表达上升,差异显著(P<0.05),三七高剂量组VEGF蛋白表达值最高;术后7天,各组VEGF值逐渐下降,其中丹参片组和三七中、高剂量VEGF值下降较为明显(P<0.01);术后14天,相对于其它组,三七高剂量组VEGF值升高显著(P<0.05)。5.毛细血管密度(MVD)测定:术后7天,三七高剂量组MVD值显著高于模型组(P<0.05);术后14天,三七高剂量组MVD高于三七低剂量组和模型组(P<0.05)。6.左下肢苏木精-伊红(HE)病理染色:正常组大鼠肌细胞排列较为规整,肌纤维之间可见血管分布;模型组血管数目相对于正常组变多,可见肌细胞萎缩,间质增生;三七

7、高剂量组血管数目多于模型组,而且肌细胞萎缩较轻;三七低、中剂量组血管数目虽然变多,但不及高剂量组;丹参片组血管数目少量增多。结论:通过对大鼠各项指标测定,初步得出三七能够促进大鼠下肢缺血模型局部缺血++组织中VEGF表达,使CD34、FLK-1阳性细胞增多,从而促进了缺血后肢血管的新生。三七高剂量组疗效明显优于三七低、中剂量组,可能和三七能够动员血管内皮祖细胞并使其向缺血组织迁移以及促进其增殖、分化有关。关键词:三七;下肢缺血;血管新生;作用研究StudyofeffectsofP

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