高压氧调控急性重症胰腺炎大鼠脾细胞凋亡的实验研究

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1、中图分类号：R657.5+1论文编号：HBLG2015-302UDC：密级：公开硕士学位论文高压氧调控急性重症胰腺炎大鼠脾细胞凋亡的实验研究作者姓名：任一鹏学科名称：外科学研究方向：急性重症胰腺炎学习单位：华北理工大学学习时间:3年提交日期:2015年4月29日申请学位类别：临床医学硕士导师姓名：张国志教授单位：华北理工大学附属医院论文评阅人：田炜教授单位：华北理工大学医学实验中心李曙光副教授单位：华北理工大学附属医院论文答辩日期：2015年6月3日答辩委员会主席：徐哲龙教授关键词：急性重症胰腺炎；高压氧；Bax/Bcl-2；

2、脾细胞；凋亡唐山华北理工大学2015年6月TheEffectofHBOonApoptosisofSplenicCellinRatsWithSevereAcutePancreatitisDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofClinicalMedicinebyRenyipeng(Surgery)Supervisor:Prof

3、essorZhangGuozhiJune,2015独创性说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定，即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校

4、有权保留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间：□自授予学位之日起；□自年月日起。作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日摘要摘要目的探讨高压氧治疗对急性重症胰腺炎大鼠脾细胞凋亡的影响，研究其发生机制，并为合理开展相关临床治疗提供理论依据。方法首先选取45只SD雄性大鼠，随机分为3组，即正常对照组（5只）、假手术（sham）组（20只）、急性重症胰腺炎（SAP）组（20只），其中sham组

5、只进行单纯的开关腹术，SAP组均采用逆行胆胰管注射牛磺胆酸钠的方法制备胰腺炎模型，sham组和SAP组各分为4个亚组，每组5只，分别在术后3h、6h、12h和24h处死。检测正常对照组和各模型组大鼠血淀粉酶，并用Westernblot方法检测所提取的各组脾组织蛋白中Bax和Bcl-2的表达量，Bax在急性重症胰腺炎各亚组中表达以6h组最高，之后降低；Bcl-2表达呈递减趋势，故选取SAP-6h组为HBO干预组；再选取30只SD雄性大鼠，随机分为急性重症胰腺炎高压氧治疗（SAP-HBO）组（15只）和急性重症胰腺炎6h（SAP-

6、6h）组（15只），其中SAP-HBO组于造模成功后1h内给予高压氧治疗（压力为2ATA，氧浓度98%，治疗时间为1h），分别于造模后6h处死SAP-HBO组和SAP-6h组。计算各组大鼠腹水量；HE染色观察胰腺组织病理变化；Westernblot方法检测所提取的各组脾组织蛋白中Bax和Bcl-2的表达量；采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的标记染色法（TUNEL法）检测脾脏细胞的凋亡，计算凋亡指数（AI）。结果1.SAP-HBO组Bax表达明显低于SAP-6h组；SAP-HBO组Bcl-2表达明显高于SAP-6h组；2.SAP-H

7、BO组凋亡指数（30.072±1.143）明显低于SAP-6h组（58.440±1.263）；3.SAP-6h组胰腺组织标本可见明显出血坏死，大量炎细胞浸润，而SAP-HBO组胰腺组织标本出血坏死及炎细胞浸润情况轻于SAP-6h组；4.SAP-HBO组腹水量（6.200±0.960ml）明显低于SAP-6h组（11.033±1.187ml）。结论SAP时，高压氧治疗可能通过增强抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，抑制促凋亡蛋白Bax的表达来抑制脾细胞的凋亡，减少免疫细胞的耗竭，调控机体免疫功能状态，保持机体免疫平衡，以此改善急性重症胰

8、腺炎。图8幅；表4个；参36篇。关键词：急性重症胰腺炎；高压氧；Bax/Bcl-2；脾细胞；凋亡分类号：R657.5+1-I-华北理工大学硕士学位论文AbstractObjectiveToinvestigatetheeffectofHBOonapoptosisofspleno