高压氧对急性重症胰腺炎大鼠肠屏障的影响.pdf

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1、今日健康2015年5月第14卷第5期·l68·JINRIJIANKANGMay2015Vo1.14No,5高压氧对急性重症胰腺炎大鼠肠屏障的影响陈迪张国志王长友崔明新(华北理工大学附属医院普通外科,河北唐山,063000)【摘要】目的探讨高压氧治疗在急性重症胰腺炎中的有效性。观察I-t/30在治疗大鼠急性胰腺炎的过程中,对肠屏障的保护作用,探讨其可能机制,并为合理开展相关临床治疗提供理论依据。方法首先选取SD雄性大鼠,采用逆行胆胰管注射牛黄胆酸钠的方法制备胰腺炎模型。SAP—H.BO组于造模成功后lh内给予高压氧治疗(压力为2ATA,氧浓度9

2、8%,治疗时间为lh),在术后3h、6h、12h和24h处死。检测正常对照组和各模型组大鼠血淀粉酶。计算SAP组及SAP-HAO组大鼠腹水量;用ELISA法检测血液中IL一2、IL一6、TNF一0【水平及血DAO活性。结果1、SAP—HBO组腹水量明显低于SAP组;2、SAP一/-I130组IL-2、IL-6及TNF一水平明显低于SAP组;3、SAP—HBO组血DAO浓度明显低于SAP组。结论SAP时,高压氧治疗可能通过控制炎症因子,保护大鼠肠黏膜屏障功能,以此改善急性重疽胰腺炎。引言采血管内,采血约2.5mL,室温下待凝血后,以3000r/

3、min离心15rain,分急性胰腺炎(Aeu~pancreatitis,AP)是胰酶在一线内被激活后引起胰离得到的上清液即为血清,移液枪吸入1.5ml至EP管中。正常对照组及腺自身消化所产生的局部炎性反应,患者病死率约为5%一10%t”。临床sham组同法取样,使用全自动生化仪检测血清胰淀粉酶(AMY)的变化。可分为轻症急性胰腺炎和重症急性胰腺炎,前者多呈自限性,而后者起1.2.5腹水收集及测量:SAP组及SAP—HAO组大鼠于术后3、6、病急,进展快,病情重,死亡率高达30%t2-3~。12、24h再次麻醉,经原腹部切口入腹,使用注射器尽可

4、能吸尽大鼠腹腔作为外科常见急腹症,除其本身的病变外,还极易并发全身炎症反及盆腔液体,收集于量筒中观察腹水性状并测量腹水量。应综合症(SIRS)和多器官功能衰竭(MODS)等并发症。目前也有许多的1.2.6ELISA法测定血液中DAO、IL一2、IL一6、TNF—o【的水平:于术研究表明SAP时肠腔内随着缺血使营养缺失,黏膜细胞出现凋亡使肠屏后第3、6、12、24h再次麻醉,经下腔静脉采血,以3000r/rain离心15min,障通透性改变,大量细菌及内毒素进入血液循环,从而诱发MODSt4-~。分离得到的上清液即为血清,移液枪吸人1.5ml至

5、EP管中。严格医学的不断进步,在研究SAP的道路上除了机制和治疗方案,越来按照购买试剂盒的说明书步骤定量测量两组大鼠血清中的DAO及细越多的人开始注重SAP的辅助治疗。本实验通过建立大鼠SAP模型,观胞因子水平。察HBO对于SAP的治疗效果,探讨其可能的机制,为合理开展相关临床1.2.7统计学分析:所得数据以均数±标准差(X±s)表示,采用治疗提供理论依据。SPSS19.0统计软件进行处理,ELISA结果使用单因素方差分析进行两两1材料与方法比较,以P<0.05为具有统计学意义。1.1实验动物:成年健康雄性sD大鼠65只,250—280g,由

6、河北联1-3结果合大学动物实验中心提供。建模的实验大鼠术前禁食12h,自由饮水。1-3.1各组大鼠血清淀粉酶的变化ELISA试剂盒由上海信帆生物科技有限公司提供。血清酶学结果显示,与正常对照组相比,模型组3、6、12、24h各亚组1.2实验方法血清淀粉酶(AMY)升高,且与正常对照组差异具有统计学意义(P

7、O)组(2O只)。其中sham组只进行单纯的开关腹术,SAP组及SAP-HAO组均采用逆行胆胰管注射牛黄胆酸钠的方法制备胰腺炎模型。sham组、SAP组及SAP—HAO组分为4个亚组,每组5只。sham组和SAP组在术后3h、6h、12h和24h处死。SA咖O组于造模成功后1h内给予高压氧治疗(压力为2ATA,氧浓度98%,治疗时间为1h),在术注:SAP组与对照组组比,P<0.05;SAP—HAO组与对照组组后3h、6h、12h和24h处死。比,P<0.05;1.2.2动物模型的制备:选成年SD大鼠,术前12h禁食,自由饮水,1.3.2SA

8、P组和SAP—HBO组腹水量的变化采用10%水合氯醛O.22g/lOOg行腹腔内注射麻醉,麻醉生效后于手术台经过HBO治疗后,SAP—HBO组大鼠腹水量较SAP组大

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