重症急性胰腺炎大鼠hmgb1表达与肠黏膜屏障损害的关系

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1、重症急性胰腺炎大鼠HMGB1表达与肠黏膜屏障损害的关系：栾正刚　张成　葛春林　马晓春　郭仁宣【摘要】目的：观察大鼠重症急性胰腺炎（severeacutepancreatitis,SAP）时肠组织中高迁移率族蛋白B1（highmobilitygroupbox-1protein,HMGB1）表达的变化及其与肠黏膜屏障损害的关系。方法：48只PO）水平，应用RT-PCR方法检测SAP大鼠肠组织中高迁移率族蛋白B1mRNA表达的变化，应用L和（26.76±3.63）U/g（P<0.01）。SAP6h时大鼠肠组织HMGB1mRNA及HMGB1表达水平显著

2、高于对照组，并于24h达峰值且持续至48h（P<0.01）。结论：SAP大鼠肠组织中HMGB1表达延迟且持续增高。HMGB1作为晚期炎症介质参与了SAP大鼠肠黏膜屏障损伤的病理生理过程。【关键词】重症急性胰腺炎·肠屏障·高迁移率族蛋白B1Relationshipbetobilitygroupbox-1proteinexpressionandgutmucosalbarrierdysfunctionduringsevereacutepancreatitis【ABSTRACT】Objective:Toinvestigatetherelationshi

3、pbetobilitygroupbox-1protein（HMGB1）expressionandgutmucosalbarrierdysfunctionduringmurinesevereacutepancreatitis（SAP）.Methods:Forty-eightmalehealthadultPO）intheintestinaltissueined.TheexpressionofHMGB1mRNAinintestinalmucosaerasechainreaction（RT-PCR）andtheactivityofHMGB1inedbyPOr

4、eachedapeaklevelat24h（16.41±4.65）μg/mLforPlasmaD-lactateand（26.76±3.63）U/gforMPOrespectively,（P<0.01）.ElevationofHMGB1andHMGB1mRNAexpressioninintestinalmucosaRNAexpressionpeakedat24hoursandkeptrelativehighvaluesupto48hourparedalcontrolgroup（P<0.01）.Conclusion:TheriseofHMG

5、B1expressionmightplayanimportantroleintheintestinalmucosalbarrierinjuriesinSAP.HMGB1asalatemediatorucosalbarrier·Highmobilitygroupbox-1protein　　重症急性胰腺炎（severeacutepancreatitis,SAP）发病凶险、并发症多、病死率高，是临床上常见的危急重症。SAP时继发肠道屏障功能衰竭，肠腔内细菌及毒素可移位至胰腺和其他脏器，其中胰腺和胰周感染是SAP的主要死因［1-2］。有研究表明，高迁移率族蛋

6、白B1（highmobilitygroupbox-1protein，HMGB1）作为一种重要的晚期炎症介质，在炎症反应过程中表达升高较晚，维持时间较长，参与了感染性休克及多器官功能障碍综合征（multipleorgandysfunctionsyndrome,MODS）的发生、发展过程［３］。本研究通过观察大鼠SAP模型肠组织内HMGB1的变化，研究其与肠黏膜屏障损害的关系，旨在从新的角度探讨SAP肠黏膜屏障损害的发生机制。1　材料与方法1.1　动物分组与SAP模型制备　健康雄性PO）活力以25℃时分解1μmolH2O2来表示。所有操作均在水浴中进行。

7、1.2.2　血浆D-乳酸水平测定　将血浆标本0.6mL+50μL高氯酸，漩涡混匀，3000r/min离心10min，留取上清液0.5mL,加30μL5.8mol/LKOH，混匀，3000r/min离心10min，除去高氯酸钾沉淀，留取上清液0.4mL，分成2管（空白管和样品测定管），各0.2mL。每管加pH9.5甘氨酸硫肼溶液（含2mg/mL的NAD+）0.9mL；样品测定管加50μLD-LDH，空白管加50μL水，置37℃水浴90min；空白管调零后，在340nm处测定样品测定管吸光度值［4］。根据标准管吸光度值（标准品购于Sigma公司），计算各

8、样品D-乳酸浓度。1.2.3　肠组织HMGB1水平检测　采用g肠组织研磨粉碎后，加入1000μL新鲜配置的冷