非小细胞肺癌脾虚痰湿证与肺郁痰瘀证差异的客观化研究

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1、分类号Ｒ２５９学校代号１０５７２ＵＤＣ６１０密级公开学号２０１２２１０１０２８广仲［中运為大摩ＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ博士学位论文非小细胞肺癌脾虚痰湿证与肺郁痰疲证差异的客观化研究学位申请人管艳““■■Ｒ指导教师姓名周仿输专业名称中西医结合临床申请学位类型科学学位论文提交日期２０１５年５月广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人

2、在导师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名■日期：２０！与年曰关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可以将本学位论文的全

3、部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印。、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者鮮日期：匆与年月么￥日／；摘要目的：１临床研究探讨非小细胞肺癌脾虚痰湿证和肺郁痰疲证两个证型在免疫指标（Ｔ淋巴细胞、ＮＫ细ＣＥＡＣＡ２５ＣＡ－胞和Ｂ淋巴细胞〉和肿瘤标志物（、１、１５３和ＣＡ１９９）水平的差异，为中医的辨证分型和临床诊疗提供依据。２实验研究利用蛋白质组学的技术方法，对非小细胞肺癌脾虚疯湿证和肺郁痰疲证两个证型的血清蛋白

4、质进行分析研宄，蹄选出两个证型之间的差异表达蛋白质，从分子生物学的角度揭示中医证型形成有关的物质基础，探讨血清蛋白质表达与疾病的中医分型之。间的关系，为非小细胞肺癌的中医辨证分型提供客观化的依据方法：１临床研宄选择非小细胞肺癌脾虚痰湿证和肺郁痰瘀证患者各３０例一，收集其般资料、理化指标、免疫指标和肿瘤标志物的结果，利用Ｓｔａｔａｌｌ．Ｏ统计软件进行统计分析，分析两证型在免疫指标和肿瘤标志物表达方面的差异。２实验研究对非小细胞肺癌脾虚痰湿证和肺郁痰疲证各３例患者的血清利用双向焚光差

5、异凝胶电泳技术分离蛋白质，扫描获取凝胶图像，并用ＤｅＣｙｄｅｒ软件对其进行分析，找出－－（ＭＬＤＩＴＯＦＭＳ）差异蛋白质点，运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对差异蛋白点进行胶内质谱分析，获取肽指纹图谱，以ＭＡＳＣＯＴ为引擎在蛋白质数据库中进行检索，以鉴定蛋白质的成分，并在ＰＡＮＴＨＥＲ网站搜索其分子功能、所参与的生物学过程及所属蛋白质分类等信息。结果：１临床研宄本研究共选取２０１３年１月至２０１５年２月在我院肿瘤科住院的确诊为非小细胞肺癌的患者６０例为研究对象，其中辨证为

6、脾虚疲湿证者和肺郁痰疲证者各３０例。脾虚－痰湿证组中包括男性患者１６例１４３４７３，腺癌２６例，麟，女性患者例，年龄岁岁４－１７１３４３７９状细胞癌例；肺郁痰疲证组包括男性患者例，女性患者例，年龄岁２０９１。岁，腺癌例，麟状细胞癌例，腺鳞癌例（１）非小细胞肺癌脾虚痰湿证组与肺郁疲疲证组之间服细胞（ＣＤ３／１６＋５６）７ｊｃ平相比，肺郁痰疲证组略高于前者，但结果无统计学意义（／＾０．０５）。（２）非小细胞肺癌脾虚痰湿证组与肺郁痰疲证组之间Ｂ淋巴细胞水平相比，肺郁Ｉ痰疲证组略高于前者

7、，但结果无统计学意义、Ｐ＞０．０５）。（３）非小细胞肺癌脾虚痰湿证组与肺郁痰疲证组之间Ｔ淋巴细胞亚群水平相比，总Ｔ细胞（ＣＤ３＋）、Ｔｈ细胞（ＣＤ３＋ＣＭ＋）、Ｔｓ细胞ＣＤ３＋ＣＤ８＋）均无明显差异。（－（４）非小细胞肺癌脾虚痰湿证组ＣＥＡ、ＣＡ１５３和ＣＡ１９９阳性率高于肺郁痰疲证组，但结果无统计学意义／＾０．０５）组ＣＡ１２５阳性率高于脾虚痰湿证组，结（；肺郁痰疲证果有统计学意义Ｋ０．０５）。（２实验研宄非小细胞肺癌脾虚痰湿证组与肺郁痰疲证组两证型之间有６个差异表达蛋白质，Ｃ

8、０９和Ｃ０４Ａ在非小细胞肺癌脾虚痰湿证组表达上调、在肺郁痰癖证组下调的是；在脾虡疲湿证组表达下调，在肺郁痰疲证组表达上调的是ＩＴＩＨ４、ＲＬＡ２、Ａ１ＡＴ和ＬＨＸ５。经生物信息学检索显示，Ｃ０９、Ｃ０４Ａ、ＩＴＩＨ４和Ａ１ＡＴ四个蛋白质直接或间接参与补体激活、蛋白水解、催化活性的调节，这，在蛋白质分类中属丝氨酸蛋白酶或其抑制因子提示非小细胞肺