葛根素促进成骨细胞增殖及信号调控机制的实验研究

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1、■＼主，ｆ分类号：Ｒ２８５．５密级；公开Ｗ或＾Ｉ研究生学位论文葛根素促进成骨细胞増殖及信号调控机制的论文题目（中文）实验研究Ｅｘｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｏｆｕｅｒａｒｉｎｏｎｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｉｃｐｙｐ论文题目（外文）ｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｉｔｓｓｉｎａｌｌｉｎａｔｈｗａｉｎｖｉｔｒｏｐｇｇｐｙ研究生姓名康蠢学科？、专业临床医学外科学＇关节外科、组织工程研％方自学位级别硕±ｔ导师姓名夏亚一教授、职称副导师姓名、职称汪静副教授胃補編

2、论Ａ文寸工了化作八％起止年月２０１３年１０月至２０１４年１０月论文提交日期２０＇１５年３月克？５论文答辩日期２０１５年５月学位授予日期２０１５年６月校址：甘肃省兰州市原创性声明Ｉ：本人郑重声明本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研巧所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点。等，均已明确注明出处除文中己经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研＾成果做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。本声明的法律责

3、任由本人承担。片＾论文作者签名；取日期：少关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借闽；本人授权兰州大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学一位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，第署名单位仍然为兰州大学。本学位论文研巧内容：□可Ｗ公开□不宜公开，

4、已在学位办公室办理保密申请。，解密后适用本授权书＂＂一Ｖ（请在Ｗ上选项内选择其中项打）／论文作者签名：取导师豁名：．日期：。ｆ全、ＬＩ日期；Ｃ７（／葛根素促进成骨细胞增殖及信号调控机制的实验研究中文摘要目的：本研究热通过分子生物学实验方研巧观察葛根素对成骨细胞增殖的促一进作用并且观察其量效关系及时效关系。进步通过抑制成骨细胞中丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）家族蛋白成员ＥＲＫ５的活性后，观察比较成骨细胞増殖过程中各个标志物及ＭＡＰＫ下游信号蛋白的基因转录及蛋白表达情况，最终阐明葛根素促进成骨细胞增殖信号调控机制。该

5、结果将会为葛根素治疗骨质疏松提供理论依据。方法：我们拟采用分子生物学实验方法，从细胞、分子水平研究葛根素对成骨细胞増殖的影响及作用机制从而观察葛根素对骨质疏松的治疗作用。－（１）制备含葛根素的培养液，将ＭＣ３Ｔ３Ｅ１成骨细胞分为非药物干预组、不同剂量（Ｏ．Ｏｌｕｍｏｌ／Ｌ、０．１皿１〇１化、ｌｕｍｏｌ／Ｌ、ｌＯｕｍｏｌ／Ｌ、ｌＯＯｕｍｏｌ／Ｌ）、不同干预一二、、兰、四、五天ＴＴ法时间（第）葛根素干预组，通过Ｍ观察成骨细胞増殖活性，观察葛根素促迸成骨细胞增殖的具体关系和找出葛根素作用成骨细胞増殖相对最佳时间和最佳浓度量。（２）

6、将成骨细胞分为非药物正常组、单纯葛根素干预组（Ｏ．Ｏｌｕｍｏｌ／Ｌ、Ｏ．ｌｕｍｏｌ／Ｌ、ｌｕｍｏｌ／Ｌ、ｌＯｕｍｏｌ／Ｌ、ｌＯＯｕｍｏＩ／Ｌ、通过台盼盛记数法，将成骨细施）分为非药物正常组、单纯葛根素干预组，通过对比成骨细胞相对増值率，找出相对最佳葛根素用药浓度，通过流式细胞仪，观察正常组和不同浓度葛根素干预组，成曾细胞増殖的细胞周期，使用Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ检测成胥细胞増殖Ｇ１／Ｓ１期ｅｒｋ５信号通路调节蛋白ＣＤＫ２、ＣｙｃｌｉｎＤｌ的表达！＾Ｊｌ及ＥＲＫ５蛋白的磯酸化，通过结果对比，ｅｒｋ５在葛根素促进成骨细胞增殖过程中有调节作

7、用。通过上述方法研究葛根素促进成骨细胞増殖过程中的信号调节机制，最终阐述葛根素促进成骨细胞増殖的作用机制。结论：ｌ．ｌｕｍｏｌ／Ｌ、ｌＯｕｍｏｌ／Ｌ和ｌＯＯｕｍｏｌ／Ｌ葛根素对成骨细胞増殖有明显的促进作。用，第五天最佳２浓度葛根素对成骨细胞作用，相对増殖率不同。．不同３成骨细胞増殖作用，主要发生在ｏｙｓｉ期。．不同浓度葛根素对４ｅｒ。．ｋ５信号通路可能是调控葛根素促进成骨细胞增殖的信号通路、关键词：葛根素细胞周期、骨质疏松、成骨细胞、信号通路、机制ＩＡｂｓ帕ｃｔＰｕｒｐｏｓｅ：Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙａｉｍｓ

8、ｔｏｉｉｗｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅ