中国大鲵sox4a、sox4b、sox4c及sox7基因cdna序列的克隆和组织表达分析

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1、’’、，，．—、．——＇＇学号分巧号０７８５Ｓ２０１２０撕５／．？：／＇？Ｋ四川农业大学碱±学位论文中国大觀Ｓｏｘ４ａ、Ｓｏｘ４ｂ、３〇义４£化５〇父７廷ＳｃＤＮＡ序列的克隆和组织表达分祈刘静指导教师主勤教授学科专业动物学研巧方向獅危动物保护２０１５年６月ＳｉｃｈｕａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＰｈ＊．Ｍ．ｄｉｓｓｅｉｔａｔｉｏｎ＊ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄｔｉｓｓｕｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃＤＮＡｅｎｃｏｄｉｎｇ５０ｘ４／文０於戸／７７

2、５＇口巧＜＾７ｅｎｅｉｎＣｈｉｎｅｓｅｉａｎｔｓａｌａｍａｎｄｅｒ１＾办／幻５ｇｇ（／ＪｉｎＬｉｕｇＤｉｒｅｄｅｄｂｙＰｒｏｆ．ｉｎＷａｎＱｇ（ｃｏｌｌｅｅｏｆｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ）ｇＹ’ａａｎ，６２５０１４，Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｐ．民．ＣｈｉｎａＪｕｎｅ，２０１５论文独削性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它一教育机构的学

3、位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本硏究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：古ｉ务辱沪叫Ｓ年；月Ｗ日关于论文巧用授巧的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、茫编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。ｉ禾）研究生签名：年Ｓ月曰诗的５：导师签名：乐叫＾年＾月《日摘要￣ｔ，、ＳｏｘｉＳ７？ｙｂｏｘｃｏｎａｉ

4、ｎｉｎｇ在动物界广泛存在目前已在鱼类、两栖类爬行（）基因类１００个成员，根据ＨＭＧ念的相似性，将其划分、鸟类和哺现类动物中发现超过一－Ｋ１１个亚族，在胚胎发育中起着至关重要的为Ａ。况基因是沉ｘＣ亚族成员之、、淋己中枢神经系统、内分泌膜岛、造血细胞、性腺等作用，主要参与也脏细胞多种器官的发育。＆ｒｃ７基因属于Ｓｗ家族Ｆ亚族，主要参与胚胎发育和细胞命运的决定。汉ｗ７基因不仅能够诱导Ｎｏｄａｌ信号分子、中胚层相关甚因Ｗ及内脏层分化－Ｔ信号途径所需的标志物基因的表达，而且是内化层Ｖ巧。本研究Ｗ中国特有的大一一？型珍稀二级保护物种，唯尚存的隐鲍銳科两栖动物中国大魄

5、舶Ｖ／航ｗｗ）ＲＴ－ＰＣＲｃＤＮＡ末为研究对象，采用逆转录聚合酶链反应（）及端快速扩增（ＲＡＣ巧技＂Ｘ姑／基３ｉｘｒ术克隆获得中国大銳汉Ｗ因的个同系物：况Ｘ如、況、如及ＳｏＺ基因的ｃＤＮＡ序列，，对其进行生物信息学分析并通过萊光定量ＰＣ民技术进行各组织：间表达情况的分析，主要取得如下结果ｃ－１，，．况；Ｃ知基因的ＤＮＡ序列为１１５３ｂｐ编码２２４个氨基酸位于巧１３０之间－ｂｏｘ是其主要功能区的ＨＭＧ，同源性分析表明中国大觀Ｓｏｘ如编码蛋白与其他物￣种况Ｗ：伯３．８％９７．２％之间物种的如蛋白构建系统发育蛋白同源性在６；对不同’树可知：麵鱼炒ｎＨＭｓ０

6、７喃０）与施氏轉以［邸ｍｙｅｒｓｃ／ｗｎｃｈＯ从进化树最先分出，随ｏｍａ化聚成一后两栖类的中国大銃与饰纹姬蛙支，錦鱼）’励ｏ一／脱ｒＺｏ（（：如〇如舶从ｍｃ於）与斑马鱼（Ｏａｎ／ｅｒ）最后分出，说明＆＞；：如基因是个古老的基因，且从中国大銳到鱼类的进化速度比较快，况Ｘ斗ｆｌ基因的基因复制时间可能在觸鱼与斑马鱼分化之前。＆Ｗ姑基因的ｃＤＮＡ序列为１０５８ｂｐ，编码１９３个氨－－基酸，位于５９１３０之间的ＨＭＧｂｏｘ是其主要功能区，同源性分析表明中国大魄说Ｘ姑编码蛋白与其他物种疏Ｘ姑蛋白同源性在６０？对不同物种的．３％９７．１％之间；说：Ｃ靴蛋白构建系统发

7、育树可知饰纹姬蛙最早从进化树分出，随后是缠鱼、瓣结鱼一，化ｅ／ｏ仍巧如６化１等几种鱼类，中国大銳与金线蛙户々舶ｘＷＣ支最后（诉）（ｐ＞如州聚成－从进化树分出沉Ｘ如基因的ｃＤＮＡ序列为９９加，１４９，５９１３０。Ｐ编码个氨基酸位于－ｂｏｘ是其主要功能区ｃ之间的ＨＭＧ，Ｓｏｊ如基因目前仅在饰纹姬蛙获得部分核巧酸片段；Ｃ如，８１．７％。，将其推导蛋白与中国大銳沉序列进行比对两者同源性高达Ｉ２－．Ｓｗ７基因的ｃＤＮＡ８４７ｂ序