柳树est-ssr标记多态性确认及其应用研究

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1、分类号Q943.2学位代码307密级GK学校代码10298学号3110076岛京林戒大学研究生硕士学位论文论文题目：柳树EST-SSR标记多态性确认及其应用研究作者：孙冲专业：植物学研究方向：植物生理生化指导教师：何开跃教授二〇一五年六月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行的研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经特别注明引用的内容和致谢的地方夕卜，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式注明

2、并表示感谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文出版授权书本人及导师完全同意《中国博士学位论文全文数据库出版章程〉〉、《中国优秀硕士学位论文全文数据库出版章程》（以下简称“章程”，见www.cnii-.net)，愿意将本人的学位论文提交“中国学术期刊（光盘版）电子杂志社”在《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库》中全文发表和以电子、网络形式公开出版，并同意编入CNKI《中国知识资源总库》，在《中国博硕士学位论文评价数据库》中使用和在互联网上传播，同意按“章程”规定享受

3、相关权益。论f密级：开□保密（_年_月至_年_月）（保密的嗲像讼式在解密后右遘守此你试）年/月/{曰年_^_月'b日致谢时光如梭，转眼间研究生生活已悄然度过。即将毕业之际，在此对许多老师、同学、朋友表达我最诚挚的谢意，是在你们的帮助之下，本论文才能顺利完成。首先感谢导师何开跃教授在研究生期间对我学习和生活上的莫大帮助，正是您的安排，才使我有机会到江苏省林科院合作培养，为我创造了良好的学习和实验条件；正是您的谆谆教诲和鼓励使我在不断的进步中茁壮成长，您严谨的治学态度、精益求精的工作作风时刻感染着我，无不令我钦

4、佩和铭记于心。本论文是在江苏省林业科学研究院完成的。在这里要感谢王保松研究员对我学习上的帮助。特别要感谢何旭东老师在我实验和学习上的指导及生活上无微不至的照顾。实验期间何旭东老师向我提供了大量的参考文献，这些文献对实验和论文的顺利完成有非常重要的参考价值，并在论文数据的分析和处理中提出了许多宝贵的意见及建议。同时要感谢林科院施士争所长，隋德宗等老师给予我学习和生活上的鼓励和帮助。他们的创新思维和开阔思路永远是我学习的榜样，他们对事业的追求和忘我精神，严谨的治学态度和严于律已的工作作风使我受益匪浅！衷心感谢中

5、国林业科学研究院热带林业研究所甘四明研究员课题组给予我实验上的耐心指导、实验材料和设备上的大力支持。感谢翁启杰老师、周长品博士、于晓丽博士、宋志娇博士、李发根博士，正是由于你们对我生活和学习上的帮助，我才得以顺利完成在广州的实验工作。在本研究过程中，教研组谢寅峰教授、陈颖副教授、施大伟老师、张强老师在毕业论文开题、中期检查过程中给予了宝贵的意见与建议，在此深表感谢。感谢同门郑纪伟、王伟伟、姚伶、郭丽君、金丹丹、王建林、乔志攀、黄明秀、未敏、杨巨仙、杨小鑫给予我热心的帮助。感谢舍友陈勤、刘瀚洋、陈步金、孟强给

6、予我精神上的鼓励和生活上的帮助。感谢11级4班所有同学提供的帮助。最后要感谢我的家人，他们给予我精神和物质上的支持，我才得以顺利完成学业，他们的理解和支持永远是我前进的动力。在此向所有学习和生活上给予我帮助的人致以最诚挚的谢意！孙冲2015年摘要本研究利用14个垂柳个体和14个钻石柳个体对前期由转录组测序开发的1082个标记进行了标记多态性确认，并选取多态性较高的13对标记构建了57个杨柳科不同个体的指纹图谱，同时检测了标记在18个欧洲红皮柳个体中的位点变异情况。主要结论如下：1对前期利用垂柳开发的424个

7、标记和利用簸箕柳开发的658个标记进行标记多态性确认，其中158对垂柳和341对簸箕柳标记扩增成功。结果表明，158个垂柳EST-SSR标记中有148个具有多态性，占93.67％，共获得731条等位片段，每个位点等位基因数从1～11个不等，每个位点平均为4.62个。平均观测杂合度(Ho)为0.7421；平均期望杂合度(He)为0.3939。平均多态信息量(PIC)为0.3563。簸箕柳341个标记中有290个在钻石柳中表现出多态性，占85.04％，共获得1100个等位片段，每个位点等位基因变异范围为1～11

8、，平均为3.22个。平均观测杂合度(Ho)为0.4731；平均期望杂合度(He)为0.5032。平均多态信息量(PIC)为0.4305。研究表明，利用垂柳和簸箕柳具有较高的多态性比例，有效性较高。2利用流式细胞仪进行杨、柳树个体的染色体倍性鉴定，结果表明，杨树个体倍性与资料记载基本一致，大部分为二倍体；柳树自然种个体为二倍体，杂交种个体大部分为四倍体，结果比较准确。利用流式细胞仪测定植物染色体倍性水平是比较理想的