杧果dfr和ufgt基因的克隆及其对果实着色的影响

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1、学校代码：学号：分类号：密级：洛泰大營硕士学位论文题目：杧果和基因的克隆及其对果实着色的影响作者：张波指导教师、赵志常副研究员：陈业渊研究员专业：种质资源学时间：二〇一五年五ClongingDFRandUFGTgenefromMango{Mangiferaindica)andeffectonfruitcoloringAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinAgricultureByZhangBoSupervisor:

2、(Major:DegreeinGermplasmResourcesSubmittedtime:May,2015海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期年月乂学位论文版权使用授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定

3、，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以为存在馆际合作关系兄弟高校用户提供文献传递服务和交换服务。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名：日期年妨卞本人已经认真阅读“高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交“高校学位论文全文数据库”中全文发布，并可按“章程”中规定享受相关权益。同意论文提交后滞后：口半年；口一年；口二年

4、发布。海南大学硕士学位论文摘要果、俗称芒果，是漆树科杧果属輪的常绿乔木植物，是热带、亚热带地区最著名的水果树种之一，具有重要的经济价值。杧果果实的色泽直接影响到消费者的心理状态从而决定了商品的价值。花色素苷是类黄酮类激素，其对果实着色有重要影响。二氢黄酮醇还原酶，是花青素代谢后期重要的酶，是决定花青素从无色到有色的关键调控点。类黄酮糖基转移酶可以把无色不稳定的花色素催化成稳定的花色素苷，作用机理是把糖基连接到不稳定的花青素上，是花色素苷合成过程中的最后一个酶的基因。本研究以成熟期几种不同着色品种的杧果为试材，釆用方法扩

5、展、以■基因全长序列，并对其进行了生物信息学和表达特性的研究。根据设计特异引物扩增得到在基组中的全长序列确定内含子的数目，同时，通过荧光定量确定这个基因在不同芒果品种的表达情况，结合对不同发育阶段的生理生化分析，确定脈和斯基因对杧果果实着色的影响。通过对这两个基因的研究希望能为杧果果实着色的部分机理的研究提供一定的实验支持，同时，为生产上杧果果实的色泽调控和成熟期的调节提供一定的理论依据。具体研究结果如下：、本实验首次从贵妃杧果中克隆得到基因其全长为开放阅读框为编码个氨基酸。进一步扩增得到其基因组，全长为分析发现其含有

6、个内含子，在已报道植物中表现保守。系统发育分析发现杧果蛋白与火鹤花、小麦和大麦等植物具有较近的亲缘关系。通过对成熟期红色的贵妃、黄色的金煌、绿色的桂七等着色的果皮中的基因表达分析，发现绿色的桂七果皮中表达量较高，而黄色果皮中表达量较低，红色的贵妃不表达，暗示调控花色苷合成的功能待深入研究。、本研究首次在杧果上在克隆出了基因。根据已知的基因片段，采用和技术克隆得到的全长。采用特异引物扩增得到该基因的基因组的全长序列，发现该基因只含有一个内含子。将该基因全长序列构建到植物表达载体中，通过诱导表达，得到大约的融合蛋白。关键词

7、；表达，序列分析，花色素苷，果实着色，克隆打果？和棊的克降及》对汜实者色的影响”丨，，、，，，‘海南大学硕士学位论文、，海南大学硕士学位论文目录刖杧果概述果实着色研究机理的研究现状色素及相关酶与果实着色的关系影响果实着色的因子果实着色的分子生物学机制二氢黄酮醇还原酶研究进展基因的结构和作用机制基因的分离基因的底物特异性基因的时空表达特性类黄酮葡萄基转移或的研究进展基因的结构和作用机制基因的分离基因的时空表达特异性本研究目的意义及设计思路研究目的和意义技术路线材料与方法材料材料及处理主要仪器及试剂菌种及克隆载体酶、生化试

8、剂试验方法的提取、纯化及质量检测杧果叶片基因组的提取产物的扩增产物的回收、纯化、连接、转化和测序实验方法总提取及质量检测弓物设计和’第一链的合成反应体系及程序全长扩增及检测杧果生理指标的测定叶绿体色素的测定花色素苷的测定生物信息学分析工具结果与分析杧果果皮总的提取杧果和基因的克隆及其对果实着色的影响杧果叶片基因组的提取克隆有关的实