（果树学专业论文）光诱导苹果果实着色相关基因的克隆和表达分析

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1、山东农业大学硕士学位论文中文摘要苹果(MalusdomesticaB．)是世界上最重要的鲜食果品之一，果实色泽是重要的外观品质。为了研究光诱导苹果果实着色的调控机制，本文克隆了与苹果着色有关的5个基因的eDNA全长和花青素合成途径中两个关键酶基因的启动子，并分析了它们的光诱导表达模式。主要结果如下：1．从苹果果皮中克隆了朋敬豫Y1、MdCRY2、燃OPl．』、刎C卯．『．2和?I纪^打曰J的全长cDNA以及花青素合成关键酶基因MdDFR和膨U粥丁的启动子。MdCRYleDNA全长2310bp，编码一条含有68

2、0个氨基酸残基的蛋白，估计分子量为76．6KD，预测等电点(pI)为5．3，含有1个高度保守的FAD结构域，MdCRYl与其它植物的CRYl同源性在60％N上，尤其是葡萄高达83．5％。MdCRY2eDNA全长2102bp，编码一条含648个氨基酸残基的蛋白，分子量约73．5KD，预测等电点(pI)为5．7，含有在2个高度保守的区域，即DNA光解酶区域和FAD区域。MdCOPl．J『eDNA全长2087bp，编码一条含665个氨基酸残基的蛋白，包含1个高度保守的WD40基序，分子量约为74．7KD，预测等电点

3、(pI)为6．4。MdCOPI．2eDNA全长2213bp，编码一条含659个氨基酸残基的蛋白，含有1个高度保守的WD40基序，分子量大小约74．2KD，预测等电点(pI)为6．2。MdMYBleDNA全长865bp，编码一条含243个氨基酸残基的蛋白，存在一个保守的R2R3结构域。MdDFR、MdUFGT启动子分别长l145bp和1674bp，它们都含有MRE、MBS或MBSI等与MYB类转录因子结合的作用元件。2．自然光明显诱导MdMYBl、MdDFR和MdUFGT基因的表达，三个基因在光诱导下的表达模式

4、相似。3．删门和MdCRY2基因的表达水平受光诱导，二者在光诱导下的表达模式相似。光诱导苹果果实着色相关基因的克隆和表达分析4．在自然光处理下，伴随着上述基因的表达被激活或调控，果皮花青素含量递增，果实实现着色。关键词：苹果(MalusdomesticaB．)；花青素；果实着色；基因克隆；表达分析2山东农业大学硕士学位论文AbstractAppleisoneofthemostimportantfreshfruitsworldwide．Peelcolorisallimportantcomponentforfi．

5、uitquality．Togetinsightintothemechanismunderlyingapplefruitcoloration,weclonedthefull—lengthcDNAsoffivecoloration-relatedgenesandthepromoterregionsoftwocontructivegenes，andanalyzedtheirexpressionlevelinthepeelofbaggingapplefruitsexposedtonaturallight．Theres

6、ultsareshownasfollows．1．Full—lengthcDNAsof5importantgenes，i．e．MdMYBl，MdCRYl，MdCRY2,MdCOPl-1andMdCOPJ『一2，associatedwithapplecoloration,aswellasthepromoterregionsoftwocontructivegenesMdDFRandMdUFGTforanthocyaninbiosynthesis，wereisolatedfromapple．Thefull-lengt

7、heDNAof朋黝门is2310bpinsize．ItsOI心encoded680aml／lOacidresidues．Theproteinispredicatedtobe76．6kDinmolecularweightand5．3inpI，andcontainsaconservedFADdomain．Compared诵吐lotherplanthomologsinGenBank．MdCRY1showed>60％identityataminoacidleveltoitscounterpartsfromotherp

8、lantspecies，especiallyupto83．5％tograpevineCRYlprotein．Thefull—lengthcDNAofMdCRY2is2102bpinsizeandencodes648aminoacidresidues．ThemolecularweightandpIofthepredictedproteinare73．5kDand5．7，respectively．The