乳酸菌对脓毒症大鼠肠道屏障功能的保护作用

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1、福建医科大学硕士学位论文分类号：R631学校代码：10392学科专业代码：100201学号：2151003254硕士学位论文乳酸菌对脓毒症大鼠肠道屏障功能的保护作用Theprotectiveeffectoflactobacillusonintestinalbarrierfunctioninsepticrats学位类型：医学硕士所在学院：协和临床医学院申请人姓名：吴菊华学科、专业：内科学（消化系病）导师：陈丰霖副教授研究起止日期：2016年3月至2018年1月答辩委员会主席：林志辉教授答辩日期：2018年5月8日二〇一八年五月福建医科大学硕士学位论文福建医科大学硕士学位论文目录中英文缩略词表2中

2、文摘要3英文摘要5前言8材料和方法11结果22讨论38结论42参考文献43综述48致谢591福建医科大学硕士学位论文中英文缩略词表英文缩写英文全称中文缩写BTBacterialTranslocation细菌移位LPSLipopolysaccharides脂多糖SIRSSystemicInflammatoryResponse全身炎症反应综合征SyndromeMODSMultipleOrganDysfunction多器官功能障碍综合征SyndromeTJTightJunctions紧密连接JAMSJunctionalAdhesionMolecule连接黏附分子ATPAdensineTriphosp

3、hate三磷酸腺苷LGGRhamnosusGGStrain鼠李糖乳杆菌GG株EPECEnteropathogenicEscherichiaColi肠致病性大肠杆菌EIECEnteroinvasiveEscherichiaColi肠侵袭性大肠杆菌TNF-αTumourNecrosisFactor-alpha肿瘤坏死因子αPMSFPhenylmethansulfonylFluoride苯甲基磺酰氟ZO-1ZonulaOccludens-1闭合小环蛋白1ZO-2ZonulaOccludens-2闭合小环蛋白2TBSTrisBufferedSalineTris缓冲液SDratsSpragueDawle

4、yratsSD大鼠WBWesternBlot免疫印迹PBSPhosphateBufferSaline磷酸盐缓冲液NCNitrocelluloseFilter硝酸纤维素SDSSodiumDodecylSulfate十二烷基硫酸钠DABDiaminobenzidine二氨基联苯胺BSAAlbuminfromBovineSerum牛血清白蛋白PProbability概率ICUIntensiveCareUnit重症加强护理病房2福建医科大学硕士学位论文乳酸菌对脓毒症大鼠肠道屏障功能的保护作用中文摘要背景：近年认为肠道屏障功能损害是脓毒症时多器官衰竭发生的始动因素。肠上皮细胞紧密连接是肠黏膜机械屏障的组

5、成部分，一旦紧密连接受损，肠上皮细胞间的通透性增加，细菌和内毒素等就可通过肠道屏障进入体循环，与多种疾病的发生发展相关。紧密连接可以用来评价肠粘膜屏障的功能。目的：用脂多糖（LPS）诱导脓毒症大鼠模型，研究植物乳酸菌对脓毒症大鼠的回肠组织紧密连接蛋白（Claudin-1、Occludin）的表达影响，进而探究植物乳酸菌是否对脓毒症大鼠肠道屏障功能起到保护作用。方法：90只清洁级健康雄性SD大鼠随机分为对照组（C组）、植物乳酸菌预处理组（LP组）、脓毒症组（LPS组）、脓毒症加乳酸菌干预组（LPS+LP组）、乳酸菌预处理加脓毒症组（LP+LPS组）。采用LPS尾静脉注射诱导脓毒症大鼠模型，LPS

6、+LP组在尾静脉注射LPS1h后灌胃植物乳酸菌一次。LP+LPS组连续灌胃3天后尾静脉注射LPS一次。处理后分别从6h、12h、24h从实验组取6只大鼠，采用透射电镜观察紧密连接超微结构，应用WesternBlot检测Claudin-1、Occludin蛋白的表达。采用免疫组织化学法、免疫荧光法检测回肠组织Claudin-1、Occludin蛋白表达情况。结果：1.实验动物干预情况：C组大鼠灌胃后无影响，生活状态良好，毛发有光泽，无异常活动反应，对外界声音、刺激反应敏感，无死亡；LP组（乳酸菌预处理组）大鼠灌胃处理后与C组无大区别，活动如常，均存活；LPS组（脓毒症组）大鼠尾静脉注射LPS后，

7、活动度大幅度减少，少食或不进食进水。毛发无光泽，拉稀便，倦怠，呼吸急促，对外界刺激反应迟钝，甚至死亡；LPS+LP组、LP+LPS组也出现相似症状。2.透射电镜观察紧密连接超微结构：在C组、LP组紧密连接结构正常，且缝隙连接无断开，微绒毛排列整齐，细胞间隙无增大；均未见异常紧密连接蛋白结构。LPS组可见多处异常紧密连接结构，如不连续，肿胀等，且伴有缝隙连接出现不连续现象，微绒毛缺如，提示脓毒症对紧