5-脂氧化酶通过MAPK_ERK通路介导胃癌细胞上皮间质转化

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1、分类号：R735.2学校代码：10392学科专业代码：100201学号：2151003255硕士学位论文5-脂氧化酶通过MAPK/ERK通路介导胃癌细胞上皮间质转化5-Lipoxygenasepromotesepithelial-mesenchymaltransitionthroughtheMAPK/ERKsignalingpathwayingastriccancer学位类型：医学硕士所在学院：协和临床医学院申请人姓名：林皓学科、专业：内科学（消化系病）导师：陈丰霖副教授研究起止日期：2016年7月至

2、2018年1月答辩委员会主席：林志辉教授答辩日期：2018年5月8日二○一八年五月福建医科大学硕士学位论文目录中英文缩略词表…………………………………………………..……..2中文摘要…………………………………………………………..……..3英文摘要………………………………………………….…………...…5前言…………………………………..………………………….…….....8材料和方法……………………………………….…………………..…10结果…………………………..……………..………………………

3、…...29讨论…………………………………………...…………….…………...42结论……………………………………………...………….…………...47参考文献……………………………………….……..…….………...…50综述…………………………………………..…......………………...…54致谢………………………………………..…….………………..…..…651福建医科大学硕士学位论文中英文缩略词表5-LOX5-lipoxygenase5-脂氧合酶;p-ERKPhosphorylati

4、onofERK磷酸化调节蛋白激酶DAPI4’,6-diamidino-2-phenylindole4',6-二脒基-2-苯基吲哚5-HETE5-Hydroxyeicosatetraenoicacid5羟基二十烷四烯酸℃Centigrade摄氏度DEPCDiethypyrocarbonate焦磷酸二乙酯ECLEnhancedchemiluminescence增强型化学法发光EMTEpithelial-mesenchymaltransition上皮间质转化FBSFetalbovineserum胎牛血清PB

5、SPhosphatebuffersaline磷酸盐缓冲液PCRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应Q-PCRReal-timeQuantitativePolymerase实时荧光定量聚合酶链式Chainreaction反应SDSSodiumdodecylsμlfate十二烷基硫酸钠TrisTris(hydroxymethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷hHour小时minMinutes分钟UICCUnionforInternationalCancerContro国

6、际抗癌联盟2福建医科大学硕士学位论文5-脂氧化酶通过MAPK/ERK通路介导胃癌细胞上皮间质转化中文摘要【研究背景】:胃癌是世界范围内癌症死亡的第三大常见原因。胃癌治疗后的侵袭和转移仍然是影响其治疗效果的重要阻碍。5-脂氧合酶（5-lipoxygenase，5-LOX）可以增强细胞增殖、迁移和侵袭的能力。上皮间质转化（Epithelial-mesenchymaltransition,EMT）被认为是肿瘤转移和侵袭的重要过程。然而，5-LOX对胃癌增殖、迁移和侵袭的作用及机制仍未被系统阐述。【目的】:探

7、讨EphA2在胃癌EMT中的作用及其机制。【方法】:收集临床胃癌组织标本，采用免疫组化检测分析5-LOX在胃癌组织的表达情况及与临床病理特征的关系；采用Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验评价5-LOX对胃癌预后的影响；采用transwell迁移、侵袭实验检测5-LOX对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响；采用蛋白免疫印迹法（westernblot）方法探究过表达5-LOX能否介导胃癌细胞促进EMT相关蛋白表达；采用建立裸鼠皮下和腹腔肿瘤模型，研究在体内水平5-LOX对胃癌细胞增殖、转移的

8、影响；采用MAPK/ERK通路抑制剂U0126探究5-LOX介导胃癌细胞发生EMT的潜在机制。【结果】:1.免疫组织化学实验表明，胃癌组织中5-LOX表达显著升高，且与部分临床病理特征有着显著联系。2.Kaplan-Meier生存曲线表明5-LOX能够显著降低胃癌病人的术后生存时间。3.CCK-8细胞增殖实验表明，过表达5-LOX胃癌细胞的OD值显著高于对照组，沉默5-LOX胃癌细胞的OD值显著低于对照组；transwell迁移、侵袭实验表明，过表达5-