陈皮陈化过程“环境因子-真菌-药效物质基础”相关性研究

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1、成都中医药大学（药学院）二〇一八届硕士研究生学位论文陈皮陈化过程“环境因子-真菌-药效物质基础”相关性研究Correlationresearchofenvironmentalfactors,fungiandeffectivesubstanceintheagingprocessofCitriReticulataePericarpium研究生姓名：刘素娟指导老师姓名：刘友平研究员学科专业：药物化学二○一八年五月学位论文陈皮陈化过程中“环境因子-真菌-药效物质基础”相关性研究Correlationresearchofenvironmentalfactors,fung

2、iandeffectivesubstanceintheagingprocessofCitriReticulataePericarpium刘素娟指导教师姓名：刘友平（研究员）申请学位级别：硕士专业名称：药物化学论文提交时间：2018.05论文答辩时间：2018.05二〇一八年五月成都中医药大学2018届硕士学位论文中文摘要陈皮为芸香科植物橘CitrusreticulataBlanco及其栽培变种的干燥成熟果皮，具有理气健脾，燥湿化痰之功，梁代陶弘景曰“橘皮疗气大胜，以陈久者良”，首次提出陈皮应陈用，陈皮由新到陈、品质逐渐改善的现象，称之为陈皮陈化。陈皮在陈化过程

3、中，极易发生霉变虫蛀，与陈化环境密切相关，且课题组前期研究发现陈皮表面微生物可引起药效成分的改变，因此本研究对陈皮陈化过程的环境因子（温湿度）、水分、真菌以及药效成分变化相关性研究，阐释陈化机制。具体研究内容如下：1陈皮干燥方式研究2016年12月在在四川省金堂县祥福镇采集大红袍Cirtusreticu1ata‘Dahongpao’果实，剥皮后按产地加工方式晒干、不同温度（40℃、60℃）烘干，另外也研究了冷冻干燥、真空干燥2种干燥方式。结果表明不同干燥方式水分含量40℃烘干＞晒干＞60℃烘干＞减压干燥＞冷冻干燥法，且均符合2015版《中国药典》一部陈皮项下水

4、分规定（≤13.0%）；不同干燥方式对黄酮类成分、辛弗林影响不大，主要影响挥发性成分，以干燥品计，挥发油含量：冷冻干燥＜晒干＜减压干燥＜60℃烘干＜40℃烘干，分别为1.09%、1.11%、1.53%、4.96%、6.33%，对挥发性成分组成分析，除烘干法未检测到，其他干燥方式则保留鲜皮中的3种成分：β-律草烯、(+)-香橙烯、β-榄香烯成分。2陈皮陈化过程研究首次对陈皮陈化过程环境因子、水分、真菌、药效物质基础变化相关性进行研究。将晒干样品陈放于阴凉干燥通风的仓库内，自然陈化3年。由于时间原因本文研究至陈化一年，即2017年1月~2018年1月，逐月取样，共

5、取样13次。2.1环境因子变化研究采用纽扣式温湿度记录仪对陈皮陈化过程仓库内环境因子（温湿度）记录：贮藏库内一年中温度在3℃~36.9℃，湿度在47%~89%之间变化，在7~10月份，温度较高，最高可达到37℃，在10~12月份，湿度较高，最高可达到89%，高温高湿期出现在9~10月份，说明贮藏库内温湿度变化符合成都市气候特征：温度夏季偏高，冬季湿冷。I成都中医药大学2018届硕士学位论文2.2水分变化研究从总水分及水分活度变化情况来看，二者变化较为剧烈，在夏季7月份时水分达到最低（7.8%），之后逐渐升高，在10月份时达到了最大（14.0%），水分活度在7月

6、份时最低为0.55，在11月时最高为0.71。因此在贮藏过程中应定时检查有无霉变及虫蛀，尤其在9~10月份，温湿度最高阶段，应选择天气晴朗的时候进行翻晒，以防霉变。2.3真菌群落结构变化研究首次应用AlphaDiversity分析陈皮陈化过程真菌群落的丰富度和多样性，结果表明，真菌种类在1~2月份逐渐增多，之后基本不变，在10月份开始种类逐渐减少；相对丰度在1~4月份逐渐增大，之后降低，在6~9月份丰度再次增大，之后逐渐减少。首次应用高通量测序技术分析陈化过程陈皮表面真菌种类主要有子囊菌门下Microidiumspp.、枝孢属（Cladosporiumspp.

7、）、念珠菌属（Candidaspp.）、Ceramothyriumspp.、青霉属（Penicilliumspp.）、Strelitzianaspp.、曲霉属（Aspergillusspp.）、酵母属（Hanseniasporaspp.）；担子菌门下Wallemiaspp.、Cyclocybespp.，这一结果与课题组前期橘皮表面真菌种群分布结果基本一致，说明陈皮表面真菌类群较为固定。在陈化过程中，子囊菌门相对丰度逐渐降低，担子菌门相对丰度逐渐升高，在10月份时，检测到曲霉属，前期丰度较低；对优势菌属分析发现陈皮在2~4月份，7~9月份优势菌属较多。2.4性状

8、变化研究观察记录陈皮在陈化过程外观颜色