两株裂解性粪肠球菌噬菌体的分离鉴定及生物学特性分析

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时间:2019-03-12

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1、分类号:单位代码:研究生学号:密级:公开吉林大学硕士学位论文学木学位)两株裂解性粪肠球菌噬菌体的分离鉴定及生物学特性分析作者姓名:张哲专业:病原生物学研究方向:噬菌体疗法指导教师:李菁华教授培养单位:基础医学院年月两株裂解性粪肠球菌噬菌体的分离鉴定及生物学特性分析作者姓名:张哲专业名称:病原生物学指导教师:李菁华教授学位类别:医学硕士答辩日期:年月日未经本论文作者的书面授权,依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人,均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出粗、改编等有碍作者著作权的商业性使用(但纯学术性使用不在此限。否则,应

2、承担侵权的法律责任。吉林大学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的硕士学位论文,是本人在指导教师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:日期:年月)曰中文摘要两株裂解性粪肠球菌噬菌体的分离鉴定及生物学特性分析近年来,抗生素和免疫抑制剂的广泛应用以及肠球菌多重耐药菌株的不断出现,肠球菌引起的医院内感染逐渐增多。特别是艾滋病人、接受化疗的癌症患者、术后和

3、器官移植病人易患肠球菌感染。在全球范围内,肠球菌感染主要是由粪肠球菌和屎肠球菌引起。研究显示,肠球菌对头孢菌素的固有耐药性、以及对万古霉素耐药性增加的趋势,导致肠球菌感染的治疗面临诸多困难。噬菌体是一类能够感染细菌的病毒,广泛存在于自然界。利用裂解性噬菌体控制细菌感染的噬菌体疗法又重新引起人们的关注。因此,积极开展肠球菌噬菌体生物学特性的研究和肠球菌感染的噬菌体疗法,具有重要的现实意义和潜在的应用价值。本项研究以株粪肠球菌和株屎肠球菌为宿主菌,从医院污水站中分离出株裂解性粪肠球菌噬菌体,分别命名为、(、和(。形态学观察发现,这株新分离的噬菌体属于有尾病毒目中的长

4、尾病毒科噬菌体。我们对噬菌体和的生物学特性进行了初步研究,通过基因测序分析了噬菌体的基因组。结果显示:(噬菌体和的头部均呈立体对称、直径约尾部呈丝状、长约;噬菌体对株肠球菌的裂解率为,而的裂解率为限制性酶切图谱表明:噬菌体(和基因组都含有、、和的酶切位点;(一步生长曲线表明,噬菌体的潜伏期为,爆发量为;噬菌体的潜伏期为爆发量为;蛋白电泳发现,(有条主要蛋白带和条次要蛋白带,有条主要蛋白带和至少种次要蛋白带,两株噬菌体的相对分子质量范围都在之间;(在稳定性试验中,噬菌体(和在°后以及在的范围内仍具有裂解宿主细胞的活性;(基因组测序发现,(基因组大小为,含量。基因组

5、有个基因(总长度为,占基因组全长的,个,个,个小卫星序列,无微卫星序列、无和。通过对分离的粪肠球菌噬菌体的初步研究,获得以下结论:粪肠球菌噬菌体、和为裂解性噬菌体,其形态学特征符合有尾病毒目(中的长尾病毒科(噬菌体。噬菌体和所具有的潜伏期短、裂解效率高、宽裂解谱以及在°和条件下仍具有裂解活性等特征,为噬菌体疗法应用于耐药性肠球菌的感染提供了依据。基因测序表明,噬菌体基因组为双链,大小为,含量。基因组有个基因,总长度为,。关键词:噬菌体疗法;噬菌体;肠球菌;耐万古霉素肠球菌AbstractIsolationandBiologicalCharacteristicof

6、TwoLyticEnterococcusBacteriophagesActiveagainstEnterococcusfaecalisInrecentyears,withwidespreaduseofantibioticsandimmunosuppressantsandincreasinglyemergenceofmulti-drugresistantEnterococcusisolates,theoccurrenceofnosocomialinfectionscausedbyenterococcihasprogressivelyincreased.Inaddi

7、tion,AIDSpatients,cancerindividualsreceivingchemotherapy,andpeopleundergoingsurgeryandorgantransplantationareeasilyatariskofenterococcalinfection.Inworldwide,EnterococcusfaecalisandEnterococcusfaeciumaccountformostinfections.Recentdataindicatethatenterococciexhibitanintrinsicresistan

8、cetocephalos

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