致病性猪链球菌安徽分离株的生物学特性研究

《致病性猪链球菌安徽分离株的生物学特性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、安徽农业大学硕士学位论文致病性猪链球菌安徽分离株的生物学特性研究姓名：许大文申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：李郁201206摘要猪链球菌病是链球菌属中猪链球菌(勋印fococc姗s以西，&s“括)、马链球菌兽疫亚种、马链球菌类马亚种以及Lancefield分群中D、E、L群链球菌引致猪的疫病的总称，临床上主要表现为淋巴结脓肿、脑膜炎、关节炎、心内膜炎以及败血症等症状。Sszf西是世界范围内引致猪链球菌病最主要的病原。Ss“括的生物学特性具有地域性差异。根据荚膜多糖可将Ss甜括分为35个血

2、清型，即l型～34型和l／2型。其中l型、2型、7型和9型对猪的致病性较强，猪2型链球菌(&增p，0∞cc“ssⅣ西serotype2，Ss甜西2)在世界范围内流行最广。本研究针对安徽地区49株致病性猪链球菌的血清型和毒力基因型分布、致病性、耐药性等相关生物学特性进行检测分析。通过观察菌落生长特征、革兰氏染色镜检，初步研究安徽地区Ss甜括的形态及培养特性和溶血性。49株Ss甜如中46株菌形态、染色、培养特征符合SJ甜厶的特点，3株菌在血平板上呈现出与其他菌株不同的形态特征；49株Ss“括在兔血平板上

3、2l株呈现Q溶血，20株呈不典型p溶血，7株p溶血，l株呈丫溶血。采用microELISA法对19株SJ“括2的溶血价测定，结果显示Q溶血、不典型p溶血和p溶血的菌株溶血价分别在在l：8～l：32，1：4～l：32，l：64～l：128之间。表明不同＆s甜西在兔血平板上的溶血类型可能不同，D溶血的Ss“西2菌株的溶血价明显高于d溶血、不典型p溶血。利用PCR分型方法对49株猪链球菌进行主要流行血清型1、2、7、9型分型鉴定。其中猪2型链球菌19株，猪l型链球菌8株，猪7型链球菌7株，分别占38．8％

4、，16．3％，14．3％，没有检测出猪9型链球菌。表明安徽省＆J材括感染存在多种血清型，其中SJ“曲2为优势血清型。根据文献合成聊伊、蕲s纱三种毒力因子基因的引物，通过PCR检测表明，49株猪链球菌中36．7％为历伊+，38．8％为印产，71．4％为s妒。PCR扩增Ss础F2毒力基因印s2J、聊伊、何和s纱，对这4种毒力基因的扩增片段进行序列测定，并与国内外其他分离株的基因序列进行比较。分析发现，57．9％(1l／19)S删西2菌株的毒力基因型为cps2J+／删—矿／P扩／奶斤，为优势基因型；Ss“

5、如2安徽分离株c筇2J、川印、P∥和s，)，基因部分序列之间及其与国内外其他地区Ss”如2分离株间的同源性分别在98．3％以上、99．2％以上、87．8％以上和99．0％以上。表明安徽省猪群中流行的Ss“括2毒力基因的分布特征与国内外报道的相似，CPS、MI冲、EPF和SLY是安徽省流行的＆5“括2的重要毒力因子。采用Kirbv．Bauer纸片琼脂扩散法检测49株S．s“括对25种临床常用药物的敏感性。安徽地区猪链球菌分离株普遍对阿莫西林、氨苄西林、利福平和先锋霉素v等敏感，敏感率分别为95．92％

6、、93．88％、85．7l％、81．63％；对杆菌肽和四环素的耐药率较高，分别达到87．76％、85．71％。所有菌株均有多重耐药性，耐3～9种抗生素的占36．7％，耐1肛19种抗生素的占53．0％，耐2肚24种抗生素的占8．1％，耐25IV种抗生素的占2．0％，多重耐药谱为杆菌肽一四环素一强力霉素一磺胺甲嗯唑。表明安徽省临床分离的致病性猪链球菌的耐药程度非常严重。按寇氏法测定5株SJ甜括2菌株的半数致死量(LD50)。发现具有B溶血，较高溶血价(1：64)及毒力基因型为脚矿／印产／s砂的菌株H儿7

7、毒力最高(LD50为1．38×lO7cFu)。表明sJ“曲2菌株毒力因其溶血性及其所携带的毒力因子的不同而有差异。关键词：猪链球菌：血清型；毒力基因；溶血性：半数致死量；耐药性；安徽地区VAbstractSwinestreptococcosisisthegeneralter】rnofpigdiseasescausedbyStreptococcussujS，streptococcusequisubsp．zooepidemictls，StreptococctlseqHis“6芦P．Pg甜jsi，”f，j

8、sandstreptococcusofLancefieldgroupingD，E，L，withthemainsymptomsofIymphnodeabscesses，meningtis，arthritis，endocarditisandsepticemia．Ss“括isthemostimportantpathogenofswinestreptococcosisworldwide．ThebiologicalcharacteristicsofS．J“iJhaVeregio