不同加工工艺鹿茸的差异蛋白质组学及抗疲劳活性研究

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1、？对京中蕃大等ＢＥＩＪＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＥＳＥＭＥＤＩＣＩＮＥ硕士研究生学位论文题目：不同加工工艺鹿萁的差异蛋白质组学及抗疲劳活性研究专业：中药制药学研究方向：中药新剂型与新技术硕士生：靳梦亚导师：董玲副研究员二〇一五年五月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研宄成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方夕卜，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得北京中医药大学或其他教育机构的学位或

2、证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。ｉ签字学位论文作者签名：補日期：学位论文版权使用授权书本人完全了解北京中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人授权北京中医药大学将本人学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并允许提交杂志社出版。□公开□保密（月）（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）年一、‘学位论文作

3、者签名：导师签名：了．＾＞签字日期０．丄４签字曰期：：Ｉ目录中文摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３６文献综述７一第章鹿葺加工工艺研究概况７１煮炸工艺７２真空冷冻干燥技术制备的冻干茸７３冻干赋形技术８４勻浆工艺９第二章蛋白质组学及其定量方法综述１０１蛋白质组学的产生１０２差异蛋白质组学产生原因及优势１０３０蛋白质定量技术１３．１双向凝胶电泳定量技术１１３．２１１同位素标记的质谱定量技术３．３非标记定１３量技术第三章ｉＴＲＡＱ技术

4、研究进展１４１ｉＴＲＡＱ技术原理１４２ｉＴＲＡＱ技术优缺点１５３ｉＴＲＡＱ技术在蛋白质组学中的应用１７３ｉ．１ＴＲＡ技术在微生物领域中的应用７Ｑ１３．２ｉＴＲＡ１７Ｑ技术在动植物研究中的应用３．３ｉＴＲＡ１７Ｑ技术在血浆研究中的应用３．４ｉＴＲＡＱ技术在中药研究中的应用１８第四章抗疲劳活性研究进展１９１抗疲劳实验研究方法９１１１．负重游泳实验１９１．２爬杆实验１９１．３Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫实验１９１．４鼠尾悬挂实验２０１５．跑台实验２０

5、２抗疲劳实验常用的生化指标２０２．１乳酸２０ｎ２．２丙二醒２０２．３尿素氮２０第五章鹿葺研究新思路２１２２ＩＴ＊研究思路２３实验研究２４一２４第章Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测量不同加工工艺鹿葺蛋白含量研究１材料与仪器２４１１２４．鹿葺１．２药品与试劍２４１．３主要仪器２４２方法与结果２４２．１样品制备２４２．２供试品溶液的制备２５－２Ｇ２．３考马斯亮蓝２５０染色液的制备５２．４方法学考察２５３小结与讨论２８第二章利用

6、２ＤＬＣ－ＭＳ对不同加工工艺鹿算差异蛋白ｉＴＲＡＱ技术联合质组学进行研究２９１仪器和材料３０１．１仪器３０１．２鹿算３０１３药品及试剂３０．２方法及结果３０２．１蛋白质酶解与标记３０２．２二维液相色谱分级分离３１？２ＩＴ．３ＭＡＬＤＯＦ／ＴＯＦ质谱鉴定３２？２．４ＭＡＬＤＩＴＯＦ／ＴＯＦ质谱分析３２２５３３．数据库检索及生物信息学分析２．６结果３３３小结与讨论６２第三章不同加工工艺鹿葺抗疲劳活性研究６３１仪器与试药６３１．１鹿

7、算６３１６３．２药品与试剂ｍ１．３主要仪器６３１．４实验动物６３２方法与结杲６３２．１方法６３２．２结果６８３小结与讨论７６全文总结７７参考文献７９魏８６８７个人筒历中文摘要＾中文摘要目的：本实验研究不同加工工艺对于鹿葺活性的影响规律，从而为加工工艺的优选提供依据。中医理论认为，鹿茸具有抗疲劳活性，而蛋白质成分又是鹿茸的主要活性成分，也具有抗疲劳活性。因此本研究以不同加工工艺（鲜品、煮炸、直接冻干、勻裝、冻干加保护剂、冻干不加保护剖、冻

8、干加保护剂４（ｒｃｉｏ天）处理的鹿算为研究对象，利用ｉＴＲＡＱ同位素标记技术寻找具有抗疲劳活性蛋白质成分的变化规律，并对差异蛋白质进行功能分类分析。建立同时体现化学和分子生物效应的信息。通过数据处理