鹿茸成分分析比较及新西兰赤鹿茸多肽的生物活性研究

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1、分类号：R931.74单位代码：10193密级：公开学号：2012116硕士学位论文鹿茸成分分析比较及新西兰赤鹿茸多肽的生物活性研究TheStudyonComparisonofCompositionsofDifferentVelvetAntlersandtheBiologicalActivityofNewZealandRedDeerVelvetAntlerPolypeptides作者姓名：胡太超学位类别：医学硕士专业名称：生药学研究方向：动物药指导教师：王全凯教授所在学院：中药材学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师

2、指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将

3、本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日摘要本文对五种鹿茸的水分，水、醇、醚浸出物，粗蛋白，粗脂肪，灰分，无机元素

4、和氨基酸含量进行了深入的分析和比较，通过原子吸收分光光度法测定了8种无机元素含量，通过氨基酸分析仪检测了17种氨基酸含量。显示了不同种属鹿茸成分的相关性和特征性，通过对不同鹿茸成分的比较为其化学成分研究，质量评价和经济开发提供依据。通过对比三种多肽的制备方法，pH12的Na2HPO4-NaOH的缓冲溶液提取的多肽蛋白含量达92.3%，在2-30KDa间有四条带。进一步对pH12的Na2HPO4-NaOH缓冲溶液提取的多肽进行DEAE离子交换色谱、SephdexG-75过滤色谱、高效液相层析分离，得到VAP-1，HPLC图谱显示为单一峰，Ticine

5、-SDS-PAGE电泳结果为单一条带，分子量在6.5-14.3KDa范围内，表明VAP-1为单一成分。研究新西兰赤鹿茸多肽对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响。将鸡红细胞和巨噬细胞混合，采用体外试管法模拟体内环境，进行体外吞噬鸡红细胞测定，各实验组与对照组相比，吞噬百分率、吞噬指数均存在极显著差异(P<0.01)；各实验组间比较，有显著差异(P<0.05)。多肽可以显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力，增强其非特异性免疫水平且随着剂量增加吞噬百分率和吞噬指数也增强，为鹿茸多肽调整免疫功效提供科学依据。研究新西兰赤鹿茸多肽对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响，将实

6、验分为对照组、多肽组、ConA+多肽组、LPS+多肽组。采用MTT法分析，结果发现多肽可促进小鼠脾淋巴细胞体外增殖，并能协同ConA、LPS促进T、B淋巴细胞增殖，提高免疫机能。通过游泳实验制备小鼠疲劳模型，测定鹿茸多肽对小鼠游泳时间、肝糖原、肌糖原、血清尿素氮(BUN)、血乳酸(LA)、乳酸脱氧酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等指标的影响，结果表明鹿茸多肽可增加肝糖原和肌糖原的含量，显著降低代谢产物LA、MDA、BUN的水平，提高LDH、SOD、GSH-Px活性，加速自由基的清除，增强小

7、鼠的抗氧化能力，提高小鼠的运动能力，起到抗疲劳作用。关键词：鹿茸，多肽，成分分析，免疫作用，抗疲劳IAbstractInthispaper,themoisture,waterextract,alcoholextract,etherextract,crudefat,crudeprotein,ash,inorganicelementsandaminoacidsoffivevelvetantlersweremeasured.The8kindsofinorganicelementsinfivevelvetantlersweredeterminedbyana

8、tomicabsorptionspectrophotometerand17kindsofaminoacidsweredet